?FITC-刀豆球蛋白A(FITC-Concanavalin A, ConA)
產(chǎn)品名稱:?FITC-刀豆球蛋白A(FITC-Concanavalin A, ConA)
產(chǎn)品描述:
FITC-刀豆球蛋白A(FITC-Concanavalin A, ConA)
一、產(chǎn)品簡介
FITC-刀豆球蛋白A(FITC-Concanavalin A,簡稱FITC-ConA)是將天然來源的刀豆球蛋白A(ConA)通過熒光素異硫氰酸酯(FITC)進(jìn)行共價(jià)標(biāo)記制備的熒光標(biāo)記蛋白。ConA是一種從刀豆(Canavalia ensiformis)種子中提取的植物凝集素,具有特異性識(shí)別和結(jié)合糖類結(jié)構(gòu)的能力,尤其對(duì)α-D-甘露糖和α-D-葡萄糖殘基具有高度親和力。
FITC標(biāo)記后,刀豆球蛋白A在保留糖結(jié)合活性的基礎(chǔ)上,賦予其綠色熒光特性(激發(fā)波長約490 nm,發(fā)射波長約520 nm),方便通過熒光顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)等技術(shù)進(jìn)行檢測和定量分析。該產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于細(xì)胞表面糖鏈的識(shí)別、細(xì)胞膜糖蛋白分析、組織切片染色及糖類相關(guān)生物過程研究。
二、結(jié)構(gòu)特性及標(biāo)記原理
刀豆球蛋白A是四聚體蛋白,分子量約為104 kDa,由四個(gè)亞單位組成,每個(gè)亞單位約26 kDa。其結(jié)構(gòu)中存在多個(gè)結(jié)合位點(diǎn),能夠特異性識(shí)別細(xì)胞表面的糖基結(jié)構(gòu)。ConA的糖結(jié)合位點(diǎn)對(duì)糖類分子的識(shí)別依賴于鈣離子和鋅離子的協(xié)同作用,結(jié)合特異性強(qiáng),且可被特定糖類抑制。
FITC通過異硫氰酸基團(tuán)與ConA的賴氨酸殘基自由氨基共價(jià)結(jié)合,形成穩(wěn)定的熒光標(biāo)記蛋白。標(biāo)記過程中嚴(yán)格控制FITC與ConA的摩爾比,確保標(biāo)記效率和糖結(jié)合活性之間的平衡,避免過度標(biāo)記導(dǎo)致活性降低。
三、產(chǎn)品規(guī)格與技術(shù)參數(shù)
參數(shù) 說明
標(biāo)記染料 熒光素異硫氰酸酯(FITC)
載體蛋白 刀豆球蛋白A(Concanavalin A)
分子量 約104 kDa(四聚體)
熒光激發(fā)波長 490 nm
熒光發(fā)射波長 520 nm
純度 ≥ 95%
產(chǎn)品規(guī)格 1 mg、5 mg、10 mg等多種規(guī)格
溶解性 PBS緩沖液、純化水良好溶解
儲(chǔ)存條件 -20℃避光保存
標(biāo)記度 通常為3-7個(gè)FITC分子/ConA分子
四、主要應(yīng)用領(lǐng)域
細(xì)胞膜糖蛋白及糖鏈研究
FITC-ConA特異性結(jié)合細(xì)胞表面α-D-甘露糖和α-D-葡萄糖殘基,常用于細(xì)胞表面糖蛋白的檢測和定量,是研究細(xì)胞膜糖基化狀態(tài)及變化的理想工具。
組織切片及免疫組織化學(xué)
利用其熒光標(biāo)記的特點(diǎn),可對(duì)組織切片中糖類分布進(jìn)行定位和定量分析,廣泛應(yīng)用于組織、炎癥反應(yīng)和發(fā)育生物學(xué)等研究領(lǐng)域。
細(xì)胞識(shí)別與分選
結(jié)合流式細(xì)胞儀,F(xiàn)ITC-ConA用于識(shí)別特定糖基表達(dá)的細(xì)胞亞群,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞分選和功能分析。
糖類代謝與信號(hào)傳導(dǎo)研究
通過檢測糖蛋白和糖鏈結(jié)構(gòu)的變化,F(xiàn)ITC-ConA幫助解析糖類在細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)和代謝調(diào)控中的作用。
病理學(xué)及疾病機(jī)制探索
糖基化異常常與癌癥、糖尿病等疾病相關(guān),F(xiàn)ITC-ConA作為糖鏈探針,有助于疾病診斷和機(jī)制研究。
五、使用方法簡述
1. 溶解及儲(chǔ)備
將FITC-ConA用PBS緩沖液(pH 7.4)或純化水輕柔溶解,常制備成1 mg/mL儲(chǔ)備液,避免劇烈振蕩導(dǎo)致蛋白變性。
2. 細(xì)胞及組織染色
細(xì)胞染色:孵育細(xì)胞于含F(xiàn)ITC-ConA的緩沖液中(一般濃度5-50 μg/mL),37℃孵育30分鐘至1小時(shí),隨后用PBS洗滌去除游離探針。
組織切片染色:將切片用FITC-ConA溶液孵育,充分結(jié)合糖類結(jié)構(gòu)后進(jìn)行洗滌和顯微鏡觀察。
3. 流式細(xì)胞術(shù)
將細(xì)胞懸液與FITC-ConA混合,適當(dāng)孵育后通過流式細(xì)胞儀進(jìn)行熒光檢測和分析。
4. 抑制實(shí)驗(yàn)
為驗(yàn)證結(jié)合特異性,可在孵育體系中加入高濃度的甘露糖或葡萄糖作為競爭抑制劑,觀察結(jié)合信號(hào)的變化。
5. 熒光檢測
利用熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測FITC熒光信號(hào),采集圖像并進(jìn)行定量分析。
六、儲(chǔ)存條件與穩(wěn)定性
建議-20℃冰箱避光保存,防止熒光素光漂白。
避免反復(fù)凍融,使用時(shí)分裝保存。
正確儲(chǔ)存條件下,產(chǎn)品穩(wěn)定性可達(dá)6個(gè)月以上。
溶液制備后建議盡快使用,避免長時(shí)間保存影響活性和熒光強(qiáng)度。
七、安全性及注意事項(xiàng)
本產(chǎn)品僅限科研使用,禁止臨床及診斷用途。
操作時(shí)請(qǐng)佩戴手套、護(hù)目鏡及實(shí)驗(yàn)服,避免與皮膚和眼睛直接接觸。
廢棄物應(yīng)按生物化學(xué)廢棄物規(guī)范處理。
避免劇烈震蕩和高溫,防止蛋白質(zhì)變性和熒光強(qiáng)度降低。
在使用過程中注意避免光照,減少熒光素光漂白。
八、技術(shù)支持與服務(wù)
我們?yōu)橛脩籼峁┤轿患夹g(shù)支持:
標(biāo)記度檢測與優(yōu)化方案。
染色及實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)指導(dǎo)。
數(shù)據(jù)處理與結(jié)果分析咨詢。
定制化標(biāo)記服務(wù)及規(guī)格調(diào)整。
如您在實(shí)驗(yàn)中遇到任何問題,歡迎隨時(shí)聯(lián)系我們的技術(shù)團(tuán)隊(duì)獲得幫助。
九、總結(jié)
FITC標(biāo)記的刀豆球蛋白A因其特異性的糖類結(jié)合能力和優(yōu)異的熒光性能,成為細(xì)胞生物學(xué)、分子醫(yī)學(xué)、組織學(xué)及病理學(xué)領(lǐng)域的理想工具。該產(chǎn)品不僅方便實(shí)現(xiàn)細(xì)胞表面糖鏈的可視化檢測,還能助力糖基化相關(guān)疾病機(jī)制的研究和診斷開發(fā)。
選擇高質(zhì)量的FITC-ConA,有助于提高實(shí)驗(yàn)的靈敏度和特異性,為科學(xué)研究提供可靠支持,推動(dòng)生命科學(xué)領(lǐng)域的深入探索與創(chuàng)新。
西安齊岳生物 — 多樣化熒光標(biāo)記服務(wù)
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廠家:西安齊岳生物科技有限公司
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