FITC-PNA 熒光素標記花生凝集素 FITC-Peanut Agglutinin
產(chǎn)品名稱:FITC-PNA 熒光素標記花生凝集素 FITC-Peanut Agglutinin
產(chǎn)品描述:
FITC-PNA 熒光素標記花生凝集素 FITC-Peanut Agglutinin
一、產(chǎn)品簡介
FITC-PNA是一種熒光標記的植物凝集素,來源于花生(Arachis hypogaea)種子。PNA是一種特異性結(jié)合糖類的蛋白,主要識別并結(jié)合半乳糖(Galβ1-3GalNAc)殘基,尤其對未被唾液酸修飾的糖鏈具有高度親和力。通過熒光素異硫氰酸酯(FITC)對PNA的共價標記,獲得了兼具糖結(jié)合特異性和綠色熒光信號的標記蛋白。
FITC-PNA廣泛應(yīng)用于細胞和組織的糖鏈結(jié)構(gòu)研究,尤其是在細胞表面糖基化分析、組織學(xué)診斷、免疫組織化學(xué)染色和流式細胞術(shù)等領(lǐng)域,成為研究糖鏈表達與功能的重要工具。
二、結(jié)構(gòu)與分子特性
PNA是一個由兩個相同亞單位組成的二聚體,每個亞單位分子量約為27 kDa,整體約54 kDa。其糖結(jié)合部位位于分子表面,能夠特異性識別Galβ1-3GalNAc結(jié)構(gòu),且結(jié)合需依賴鈣離子。PNA的結(jié)合特點使其成為檢測O-連接糖蛋白核心1結(jié)構(gòu)(T*原)的理想探針。
FITC分子通過異硫氰酸基與PNA蛋白表面的賴氨酸氨基發(fā)生共價結(jié)合,形成穩(wěn)定的熒光標記,標記過程中控制FITC與PNA的比例,既保證熒光強度,又保持糖結(jié)合活性。
三、產(chǎn)品規(guī)格與技術(shù)參數(shù)
參數(shù) 說明
標記染料 熒光素異硫氰酸酯(FITC)
載體蛋白 花生四烯酸凝集素(Peanut Agglutinin)
分子量 約54 kDa(雙亞單位二聚體)
熒光激發(fā)波長 490 nm
熒光發(fā)射波長 520 nm
純度 ≥ 95%
產(chǎn)品規(guī)格 1 mg、5 mg、10 mg等多種規(guī)格
溶解性 PBS緩沖液、純化水良好溶解
儲存條件 -20℃避光保存
標記度 3-7個FITC分子/每個PNA分子
四、主要應(yīng)用領(lǐng)域
糖鏈結(jié)構(gòu)分析
FITC-PNA能夠特異性結(jié)合細胞和組織中的Galβ1-3GalNAc糖基結(jié)構(gòu),常用于細胞表面及細胞外基質(zhì)中糖蛋白的糖基化分析,是研究細胞糖基化狀態(tài)及其變化的有力工具。
免疫組織化學(xué)與組織切片染色
通過熒光標記,F(xiàn)ITC-PNA可對組織切片中糖類的分布進行定位,廣泛用于標志物檢測、發(fā)育生物學(xué)及病理學(xué)研究。
診斷及標志物研究
PNA對未唾液酸化的O-連接糖蛋白(T*原)的高親和力使其成為細胞糖鏈異常表達的檢測利器,有助于癌癥早期診斷及分型。
流式細胞術(shù)與細胞分選
FITC-PNA用于流式細胞儀分析特定細胞群體的糖基化表達,輔助細胞分選及功能研究。
受體結(jié)合與細胞信號研究
通過檢測糖鏈的變化,F(xiàn)ITC-PNA幫助揭示糖基化在細胞識別、信號傳導(dǎo)和免疫調(diào)節(jié)中的作用。
五、使用方法簡述
1. 溶解與儲備
將FITC-PNA用PBS緩沖液(pH 7.4)或純化水輕柔溶解,常制備成1 mg/mL儲備液,避免劇烈振蕩以保護蛋白活性。
2. 細胞及組織染色
細胞染色:將細胞懸浮于含F(xiàn)ITC-PNA的緩沖液中,濃度一般為5-50 μg/mL,在室溫或37℃孵育30分鐘至1小時。孵育后用PBS洗滌以去除未結(jié)合的探針。
組織切片染色:組織切片浸泡于FITC-PNA溶液中孵育,結(jié)合后洗滌,使用熒光顯微鏡觀察。
3. 流式細胞術(shù)
將細胞與FITC-PNA混合孵育后,進行流式細胞分析,檢測細胞表面糖基表達及細胞群體異質(zhì)性。
4. 抑制實驗
為驗證特異性結(jié)合,可加入過量的半乳糖或其他特異性糖類競爭性抑制,觀察結(jié)合信號變化。
5. 熒光檢測
使用激發(fā)波長約490 nm,發(fā)射波長約520 nm的熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡或流式細胞儀進行檢測和圖像采集。
六、儲存條件與穩(wěn)定性
建議在-20℃冰箱避光保存,避免熒光素光漂白。
避免反復(fù)凍融,使用時分裝保存,確保蛋白活性。
在合適條件下,產(chǎn)品可穩(wěn)定保存6個月以上。
使用時盡量減少光照和高溫環(huán)境。
七、安全性及注意事項
本產(chǎn)品僅限科研用途,禁止臨床及診斷應(yīng)用。
實驗過程中需佩戴手套、護目鏡及實驗服,防止直接接觸。
廢棄物應(yīng)按照實驗室規(guī)范妥善處理。
避免劇烈振蕩和高溫,保持蛋白結(jié)構(gòu)和熒光性能。
使用時避免長時間光照,防止熒光素光漂白。
八、技術(shù)支持與服務(wù)
我們提供完善的技術(shù)支持:
標記度檢測及優(yōu)化指導(dǎo)。
實驗設(shè)計與染色方案咨詢。
數(shù)據(jù)分析與結(jié)果解讀。
定制化規(guī)格和標記度服務(wù)。
如有任何疑問或個性化需求,歡迎聯(lián)系技術(shù)團隊。
九、總結(jié)
FITC-PNA結(jié)合了花生四烯酸凝集素特異識別糖鏈的能力和FITC優(yōu)異的熒光性能,是研究細胞表面糖基化、糖生物標志物及細胞糖類相互作用的重要工具。通過高質(zhì)量標記和嚴格純化,F(xiàn)ITC-PNA能夠為科研工作提供高靈敏度和高特異性的檢測手段,廣泛適用于細胞生物學(xué)、學(xué)及免疫學(xué)領(lǐng)域。
選擇優(yōu)質(zhì)FITC-PNA助力科研人員深入揭示糖鏈調(diào)控機制,推動生命科學(xué)研究及疾病診斷技術(shù)的發(fā)展。
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