FITC-LPS 熒光素標(biāo)記脂多糖 FITC-labeled Lipopolysaccharide
產(chǎn)品名稱:FITC-LPS 熒光素標(biāo)記脂多糖 FITC-labeled Lipopolysaccharide
產(chǎn)品描述:
FITC-LPS 熒光素標(biāo)記脂多糖 FITC-labeled Lipopolysaccharide
一、產(chǎn)品概述
產(chǎn)品名稱:FITC-LPS(熒光素標(biāo)記脂多糖)
英文名稱:FITC-labeled Lipopolysaccharide
別名:Fluorescein Isothiocyanate-LPS;熒光標(biāo)記脂多糖
常見來源:大腸桿菌(E. coli O55:B5、O111:B4、O26:B6 等)
分子量:>10,000 Da(天然LPS為高分子雜多糖,分子量不定)
純度:≥95%(脫蛋白)
熒光激發(fā)/發(fā)射波長:Ex 495 nm / Em 520 nm
外觀:淡黃綠色至黃綠色凍干粉末或溶液
溶解性:可溶于PBS、H?O、DMSO、緩沖液等
儲(chǔ)存條件:-20°C避光干燥保存(推薦避光分裝)
保質(zhì)期:12個(gè)月(未開封)
二、產(chǎn)品結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)
1. LPS結(jié)構(gòu)簡介
脂多糖(LPS)是革蘭氏陰性菌外膜的重要組成部分,由三部分構(gòu)成:
脂A(Lipid A):LPS的疏水部分,負(fù)責(zé)激活Toll樣受體(TLR4);
核心多糖(Core oligosaccharide):連接脂A與O原;
O-特異性原(O-antigen):重復(fù)單位組成的長鏈多糖,決定菌株的特異性。
2. FITC標(biāo)記原理
FITC(Fluorescein isothiocyanate)通過異硫氰酸基(–N=C=S)與LPS中的伯胺類基團(tuán)(主要來源于修飾的核心糖或微量蛋白)發(fā)生共價(jià)反應(yīng),形成穩(wěn)定的硫脲結(jié)構(gòu),實(shí)現(xiàn)熒光標(biāo)記。標(biāo)記后LPS保留免疫活性和細(xì)胞識別功能,同時(shí)具備強(qiáng)烈綠色熒光。
3. 熒光性能
激發(fā)波長:495 nm
發(fā)射波長:520 nm
適用檢測儀器:熒光顯微鏡、激光共聚焦、流式細(xì)胞儀、板式讀數(shù)儀等。
三、合成與質(zhì)量控制
1. 合成步驟簡述
將高純度LPS溶于堿性緩沖液(如碳酸氫鈉緩沖液);
將FITC溶于DMSO,緩慢加入LPS溶液中;
室溫反應(yīng) 2~4 小時(shí),避光;
采用透析袋(MWCO ~3.5 kDa)或凝膠層析去除未結(jié)合的FITC;
冷凍干燥,終得粉末狀FITC-LPS。
2. 質(zhì)控指標(biāo)
FITC結(jié)合度:一般為0.5–2 mol FITC/mol LPS;
熒光強(qiáng)度:確保高信噪比;
LPS活性檢測:保留對TLR4的激活能力(可通過細(xì)胞實(shí)驗(yàn)或HEK-Blue? hTLR4系統(tǒng)檢測);
無蛋白殘留:采用蛋白酶和凝膠色譜去除污染。
四、應(yīng)用方向
1. 免疫學(xué)研究
FITC-LPS常被用于研究LPS介導(dǎo)的免疫應(yīng)答,如:
TLR4介導(dǎo)的先天免疫激活;
單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的識別與激活;
炎癥因子(如IL-6、TNF-α)釋放研究;
細(xì)胞因子表達(dá)分析;
體內(nèi)外炎癥模型構(gòu)建。
2. 細(xì)胞攝取與定位
通過FITC標(biāo)記,可追蹤LPS的攝取、胞內(nèi)運(yùn)輸與分布:
巨噬細(xì)胞攝取動(dòng)力學(xué)研究;
內(nèi)吞通路與胞內(nèi)運(yùn)輸分析(如與溶酶體共定位);
LPS與膜蛋白/受體的結(jié)合行為觀察;
可與DAPI、LysoTracker等染料共染成像。
3. 流式細(xì)胞術(shù)分析
FITC-LPS可用于:
分析LPS與細(xì)胞表面或胞內(nèi)受體結(jié)合情況;
測定不同細(xì)胞類型對LPS的響應(yīng)程度;
鑒別高攝取亞群;
研究LPS競爭性抑制或中和體活性。
4. 納米遞送系統(tǒng)的模型分子
由于LPS分子大、復(fù)雜且結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,F(xiàn)ITC-LPS常用于:
熒光示蹤LPS包裹或共價(jià)修飾的納米顆粒;
構(gòu)建LPS仿生膜模型;
研究LPS在遞送系統(tǒng)中釋放機(jī)制與靶向能力。
五、使用方法與建議
1. 溶解方法
推薦緩慢加入無菌PBS緩沖液(pH 7.4)中,輕微渦旋;
可用37°C水浴短暫加熱以助溶;
避免劇烈震蕩,防止分子解聚。
2. 工作濃度建議
實(shí)驗(yàn)類型 推薦濃度
免疫刺激(細(xì)胞) 10–100 ng/mL
成像實(shí)驗(yàn) 1–10 μg/mL
流式細(xì)胞術(shù) 0.1–5 μg/mL
3. 保存與分裝
建議溶液分裝儲(chǔ)存在-20°C,避光;
避免反復(fù)凍融,使用低吸附EP管;
粉末狀態(tài)可保存12個(gè)月,溶液建議1個(gè)月內(nèi)用完。
六、注意事項(xiàng)
FITC對光敏感,操作過程中需避免強(qiáng)光照射;
部分細(xì)胞系對LPS特別敏感,需預(yù)實(shí)驗(yàn)確定濃度;
不同菌株來源的LPS免疫原性不同,選擇應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求;
如用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn),請注意其致熱性和炎癥反應(yīng)強(qiáng)度;
FITC可能干擾LPS結(jié)構(gòu)或功能,務(wù)必驗(yàn)證其生物活性是否保留。
七、包裝信息
包裝規(guī)格 貨號示例 儲(chǔ)存溫度 形態(tài)
100 μg FITC-LPS-100 -20°C 凍干粉
500 μg FITC-LPS-500 -20°C 凍干粉
1 mg FITC-LPS-1MG -20°C 凍干粉或水溶液
定制規(guī)格 可定制菌株/濃度 -20°C 客戶指定
可根據(jù)客戶需求提供不同菌株來源(E. coli O55:B5, O111:B4 等)或不同F(xiàn)ITC標(biāo)記密度的產(chǎn)品。
八、相關(guān)產(chǎn)品推薦
FITC-LTA(脂磷壁酸):用于革蘭陽性菌成分標(biāo)記;
Cy5-LPS / TRITC-LPS:用于多通道成像;
FITC-Dextran:用于細(xì)胞通透性和內(nèi)吞實(shí)驗(yàn);
TLR4拮劑(如TAK-242):配合使用用于信號通路研究。
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廠家:西安齊岳生物科技有限公司
用途:科研
狀態(tài):固體/粉末/溶液
產(chǎn)地:西安
溫馨提醒:僅供科研,不能用于人體實(shí)驗(yàn)!
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