RB-Cytochrome C 羅丹明標記細胞色素C RB標記細胞色素C
產(chǎn)品名稱:RB-Cytochrome C 羅丹明標記細胞色素C RB標記細胞色素C
產(chǎn)品描述:
RB-Cytochrome C 羅丹明標記細胞色素C RB標記細胞色素C
產(chǎn)品概述
RB-Cytochrome C 是一種將紅色熒光染料 羅丹明 B(Rhodamine B, RB) 共價標記于細胞色素 C 分子上的高性能生物試劑。細胞色素 C 是線粒體內(nèi)的重要小分子血紅素蛋白,在電子傳遞鏈中負責電子傳遞,同時在凋亡信號傳導中起關(guān)鍵作用。通過羅丹明 B 的標記,細胞色素 C 不僅保留其天然功能,還具備了紅色熒光可視化特性,為蛋白質(zhì)定位、凋亡機制研究以及細胞內(nèi)動態(tài)追蹤提供了直觀工具。
RB-Cytochrome C 在 540–550 nm 激發(fā)光下可發(fā)射約 565–580 nm 的紅色熒光,適合在熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡或流式細胞儀中檢測,便于研究線粒體功能、蛋白質(zhì)內(nèi)化及藥物作用機制。
化學結(jié)構(gòu)與標記原理
RB-Cytochrome C 的標記原理是通過羅丹明 B 的活性基團(如異硫氰酸酯或羧基活化形式)與細胞色素 C 分子上的賴氨酸 ε-氨基或 N 端氨基形成穩(wěn)定共價鍵。該結(jié)合方式確保標記牢固,同時盡量保留蛋白的天然折疊和生物活性。
主要化學特性包括:
分子量略高于天然細胞色素 C,取決于標記的 RB 分子數(shù);
良好的水溶性,可溶于 PBS、Tris 等中性緩沖液;
熒光性質(zhì)穩(wěn)定,可在中性環(huán)境下長期保存和使用;
生物學活性保持良好,可參與電子傳遞及凋亡相關(guān)實驗。
產(chǎn)品規(guī)格
常規(guī)規(guī)格如下:
濃度范圍:0.1–1 mg/mL,實驗中可根據(jù)需求稀釋;
儲存條件:-20℃ 凍存避光,短期可 4℃ 保存;
緩沖體系:一般使用 PBS 或 Tris 緩沖液,可加入少量 BSA 或甘油穩(wěn)定蛋白;
包裝形式:凍干粉或凍存液體,便于實驗使用。
功能特點
紅色熒光可視化:羅丹明 B 信號強,便于低濃度檢測與空間定位;
生物活性保留:標記后仍可維持細胞色素 C 的電子傳遞和凋亡功能;
高靈敏度:紅色熒光在生物樣品中背景低,便于確定量和成像;
多實驗兼容性:可與綠色、藍色或近紅外熒光標記的分子組合,實現(xiàn)多色共定位實驗;
操作簡便:標記穩(wěn)定、*光漂白能力良好,可直接用于多種實驗條件。
主要應用方向
1. 細胞凋亡研究
RB-Cytochrome C 可用于追蹤線粒體向細胞質(zhì)釋放的過程,研究凋亡啟動和執(zhí)行機制。通過熒光顯微鏡觀察紅色熒光信號從線粒體擴散到胞質(zhì),可實時評估凋亡水平及藥物對凋亡通路的影響。
2. 線粒體功能與蛋白內(nèi)化研究
可用于分析蛋白質(zhì)在細胞內(nèi)的攝取、分布及線粒體膜通透性,為線粒體相關(guān)疾病、氧化應激及細胞信號研究提供可靠手段。
3. 熒光成像與共聚焦顯微鏡應用
RB-Cytochrome C 可在共聚焦顯微鏡下進行高分辨率成像,用于蛋白分布、亞細胞結(jié)構(gòu)定位及藥物作用機制分析。
4. 熒光免疫學與蛋白質(zhì)相互作用分析
可作為紅色熒光探針參與免疫標記和蛋白-蛋白相互作用實驗,實現(xiàn)多色熒光共定位和分子動力學分析。
5. 藥物篩選與蛋白動力學研究
在藥物篩選實驗中,可通過紅色熒光變化監(jiān)測蛋白質(zhì)活性和藥物作用效果,為高通量篩選和藥物提供直觀數(shù)據(jù)。
使用注意事項
光敏性:羅丹明 B 對光敏感,操作及存儲需避光;
緩沖條件:建議在中性緩沖液中使用(pH 7–8),端酸堿環(huán)境可能影響蛋白活性和熒光信號;
凍融循環(huán):避免多次凍融,可分裝凍存以保證活性和熒光強度;
濃度控制:實驗中應合理稀釋,避免熒光淬滅或過量蛋白引起非特異性作用;
安全防護:作為蛋白標記試劑,應佩戴手套、護目鏡,嚴格遵守生物實驗室安全規(guī)范。
小結(jié)
RB-Cytochrome C 是一種兼具 生物活性與紅色熒光可視化功能 的高性能生物試劑,適用于細胞凋亡研究、線粒體功能分析、蛋白內(nèi)化及分布追蹤、共定位實驗以及藥物篩選等多種應用。其紅色熒光信號穩(wěn)定、操作便捷、*光漂白能力強,使其成為現(xiàn)代細胞生物學、分子生物學及藥物研發(fā)研究中不可或缺的工具。通過合理設計實驗條件,RB-Cytochrome C 能夠提供可靠的熒光數(shù)據(jù)和定量信息,為科研人員在蛋白質(zhì)定位、功能解析及信號通路研究中提供直觀、科學的實驗支持。
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