FITC-Casein FITC-酪蛋白 異硫氰酸熒光素標(biāo)記酪蛋白
產(chǎn)品名稱:FITC-Casein FITC-酪蛋白 異硫氰酸熒光素標(biāo)記酪蛋白
產(chǎn)品描述:
FITC-Casein FITC-酪蛋白 異硫氰酸熒光素標(biāo)記酪蛋白
一、產(chǎn)品概述
FITC-Casein(異硫氰酸熒光素標(biāo)記酪蛋白) 是通過將 異硫氰酸熒光素(Fluorescein Isothiocyanate,F(xiàn)ITC) 共價(jià)偶聯(lián)到 酪蛋白(Casein) 分子上而制備的一種熒光標(biāo)記蛋白探針。酪蛋白是乳制品中含量豐富的蛋白之一,主要存在于牛奶中,屬于一類磷蛋白,具有良好的溶解性、穩(wěn)定性以及豐富的氨基酸殘基,因此在生物化學(xué)和分子生物學(xué)研究中被廣泛應(yīng)用。
通過將 FITC 引入酪蛋白分子結(jié)構(gòu)中,可以在保持酪蛋白基本理化性質(zhì)的同時(shí)賦予其穩(wěn)定的 綠色熒光信號。FITC 在 約490 nm 激發(fā)波長條件下可產(chǎn)生 約520 nm 發(fā)射波長的綠色熒光,能夠被熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞儀以及熒光酶標(biāo)儀等多種儀器檢測。因此,F(xiàn)ITC-Casein 常被用于 蛋白酶活性檢測、細(xì)胞攝取研究、熒光成像以及生物材料表面蛋白吸附研究等實(shí)驗(yàn)。
在生物醫(yī)學(xué)研究中,F(xiàn)ITC-Casein 作為一種熒光底物或熒光示蹤蛋白,可以幫助研究人員直觀地觀察蛋白在生物體系中的分布和降解過程,從而為蛋白水解機(jī)制研究和細(xì)胞功能研究提供重要工具。
二、分子結(jié)構(gòu)與標(biāo)記原理
FITC-Casein 的制備基于 FITC 的異硫氰酸基團(tuán)(–N=C=S) 與酪蛋白分子中 賴氨酸殘基的氨基(–NH?) 之間的共價(jià)反應(yīng)。該反應(yīng)通常在弱堿性條件下進(jìn)行,通過形成穩(wěn)定的 硫脲鍵(thiourea bond) 實(shí)現(xiàn)熒光染料與蛋白質(zhì)之間的結(jié)合。
酪蛋白是一類結(jié)構(gòu)相對松散的蛋白質(zhì),由多個亞型組成,包括 αs1-酪蛋白、αs2-酪蛋白、β-酪蛋白和κ-酪蛋白。其分子中含有大量可反應(yīng)的氨基酸殘基,這使得 FITC 能夠較容易地與其發(fā)生共價(jià)偶聯(lián)。
在標(biāo)記過程中,需要控制 FITC 與酪蛋白的反應(yīng)比例,以獲得適當(dāng)?shù)?標(biāo)記度(Degree of Labeling,DOL)。過高的標(biāo)記度可能會影響蛋白結(jié)構(gòu),而適度的標(biāo)記則能夠在保證熒光強(qiáng)度的同時(shí)維持蛋白的功能特性。
三、產(chǎn)品理化性質(zhì)
FITC-Casein 兼具蛋白質(zhì)和熒光染料的特性,其典型理化參數(shù)如下:
激發(fā)波長(Ex):約 488–495 nm
發(fā)射波長(Em):約 515–525 nm
外觀:黃色或淺綠色凍干粉末
溶解性:易溶于 PBS、Tris 緩沖液等水溶性緩沖體系
標(biāo)記度:通常為數(shù)個 FITC/蛋白分子
儲存條件:?20℃ 避光保存
穩(wěn)定性:避免反復(fù)凍融
由于 FITC 對光敏感,因此在儲存和實(shí)驗(yàn)操作過程中應(yīng)盡量避免強(qiáng)光照射,以保持熒光穩(wěn)定性。
四、產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 明亮穩(wěn)定的綠色熒光
FITC-Casein 能夠提供穩(wěn)定且易于檢測的綠色熒光信號,適用于多種熒光檢測平臺。
2. 高靈敏度檢測
FITC 具有較高的熒光量子產(chǎn)率,使該探針在低濃度條件下仍具有良好的檢測靈敏度。
3. 良好的生物相容性
酪蛋白來源于天然乳蛋白,具有良好的生物相容性和穩(wěn)定性。
4. 適合作為蛋白酶底物
FITC-Casein 常被用于蛋白酶活性檢測實(shí)驗(yàn),通過熒光變化監(jiān)測蛋白水解過程。
5. 兼容多色熒光實(shí)驗(yàn)
FITC-Casein 可以與 Cy3、Cy5、Cy7 等熒光染料聯(lián)合使用,實(shí)現(xiàn)多通道熒光成像。
五、主要應(yīng)用領(lǐng)域
1. 蛋白酶活性檢測
FITC-Casein 是研究蛋白酶活性的重要熒光底物。當(dāng)酪蛋白被蛋白酶水解時(shí),熒光信號會發(fā)生變化,從而可以通過熒光檢測方法分析酶活性。
2. 細(xì)胞攝取研究
通過熒光顯微鏡或流式細(xì)胞術(shù),可以觀察細(xì)胞對酪蛋白的攝取過程及其在細(xì)胞中的分布。
3. 熒光成像研究
FITC-Casein 可用于共聚焦顯微鏡實(shí)驗(yàn),用于研究蛋白在細(xì)胞或組織中的定位。
4. 生物材料表面蛋白吸附研究
在生物材料或醫(yī)療器械研究中,F(xiàn)ITC-Casein 可用于檢測材料表面對蛋白質(zhì)的吸附行為。
5. 納米藥物載體研究
在納米藥物遞送系統(tǒng)中,F(xiàn)ITC-Casein 可作為熒光標(biāo)記蛋白,用于研究納米顆粒與蛋白之間的相互作用。
六、實(shí)驗(yàn)使用建議
在使用 FITC-Casein 時(shí)建議注意以下事項(xiàng):
避光操作
FITC 對光較為敏感,應(yīng)在避光條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。
緩沖液選擇
建議使用不含游離氨基的緩沖液,以避免影響熒光穩(wěn)定性。
避免反復(fù)凍融
分裝保存可提高蛋白穩(wěn)定性。
優(yōu)化實(shí)驗(yàn)濃度
根據(jù)實(shí)驗(yàn)體系選擇合適的工作濃度,以獲得佳熒光信號。
溫度控制
在進(jìn)行酶活實(shí)驗(yàn)時(shí),應(yīng)根據(jù)目標(biāo)酶的適溫度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
七、總結(jié)
FITC-Casein 是一種將 酪蛋白與 FITC 熒光染料共價(jià)結(jié)合而形成的熒光標(biāo)記蛋白探針。該分子能夠在保持酪蛋白基本結(jié)構(gòu)和功能的同時(shí)提供穩(wěn)定的綠色熒光信號,使研究人員能夠直觀地觀察蛋白在生物體系中的分布和降解過程。
由于其優(yōu)良的熒光性質(zhì)和良好的生物相容性,F(xiàn)ITC-Casein 在 蛋白酶活性檢測、細(xì)胞攝取研究、熒光成像以及生物材料研究等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用價(jià)值。該產(chǎn)品為蛋白質(zhì)研究和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)提供了一種可靠且高效的熒光工具,有助于推動生命科學(xué)領(lǐng)域的深入研究。
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