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CY5?Thapsigargin CY5?毒胡蘿卜素 熒光標記毒胡蘿卜素
文章來源 : 齊岳生物
作者:小編zyl
發(fā)布時間 : 2026-03-04 15:26:51
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產(chǎn)品名稱:CY5?Thapsigargin CY5?毒胡蘿卜素 熒光標記毒胡蘿卜素
產(chǎn)品描述:
CY5?Thapsigargin CY5?毒胡蘿卜素 熒光標記毒胡蘿卜素
一、產(chǎn)品概述
CY5?Thapsigargin 是一種將遠紅熒光染料 Cyanine5(CY5) 分子通過穩(wěn)定的共價偶聯(lián)方式標記到 Thapsigargin(毒胡蘿卜素) 上的熒光探針。Thapsigargin 是一種來源于地中海植物 Thapsia garganica 的天然倍半萜內(nèi)酯類小分子,作為 鈣泵(SERCA)抑制劑 在細胞信號轉導、細胞應激反應與細胞死亡機制研究中具有重要作用。
通過將 CY5 遠紅熒光團連接到 Thapsigargin 分子上,CY5?Thapsigargin 不僅保留了原始化合物對 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣泵 SERCA(Sarco/Endoplasmic Reticulum Ca2??ATPase) 的高親和力,還具備可在細胞和組織樣本中可視化定位、動態(tài)追蹤和定量分析的強大光學特性,使其成為研究細胞鈣穩(wěn)態(tài)、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激和藥物作用機制的重要工具。
二、化學結構與共價偶聯(lián)機制
1. Thapsigargin 的結構特性
Thapsigargin 是一種結構復雜的倍半萜內(nèi)酯天然產(chǎn)物,主要包含多個環(huán)結構與酯基團,其對 SERCA 的高親和力使得它可有效阻斷 ER 鈣泵功能,導致細胞內(nèi)鈣離子水平升高。這一獨特的分子結構為標記提供了偶聯(lián)位點,同時對功能區(qū)域影響較小,因此適合用于設計衍生熒光探針。
2. CY5 熒光團介紹
CY5 是一種擁有遠紅至近紅外光譜發(fā)射的大分子熒光染料:
激發(fā)波長:約 650?nm
發(fā)射波長:約 670?nm
優(yōu)點:
低細胞自發(fā)熒光背景;
深組織成像穿透;
與常見熒光通道(如 FITC、DAPI 等)兼容適合多通道成像。
3. 共價偶聯(lián)策略
CY5?Thapsigargin 的制備通常采用成熟的化學偶聯(lián)方法:
活化反應:Thapsigargin 分子上的羥基或酯基可以通過適當化學修飾引入親核或電性活化官能團;
偶聯(lián)方式:通過 CY5 的活性衍生物(如 CY5?NHS 酯、CY5?maleimide 等)與 Thapsigargin 分子上的可反應基團形成 穩(wěn)定的共價鍵(如酰胺鍵);
穩(wěn)定連接:共價偶聯(lián)確保在細胞內(nèi)復雜環(huán)境下熒光團穩(wěn)定附著,降低信號丟失或非特異性游離染料干擾。
三、光學特性與性能優(yōu)勢
CY5?Thapsigargin 探針具有顯著的光學性能:
1. 遠紅光譜發(fā)射
激發(fā)波長:約 650?nm
發(fā)射波長:約 670?nm
這種遠紅光譜顯著低于細胞自身自發(fā)熒光的背景區(qū)域,使得在復雜生物體系中成像信號更清晰、對比度更高。
2. 高信噪比與光穩(wěn)定性
CY5 熒光團提供強烈信號;
遠紅通道有效減少背景干擾;
的光穩(wěn)定性適合長時間共聚焦或活體成像實驗。
四、生物學功能與應用領域
1. SERCA 抑制機制研究
Thapsigargin 是一種經(jīng)典的 SERCA 抑制劑,通過阻斷內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣泵使細胞內(nèi)鈣離子水平失衡,從而誘導內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激和下游細胞應答通路。CY5?Thapsigargin 探針可用于:
實時可視化 SERCA 結合位點;
追蹤 Thapsigargin 在細胞內(nèi)的分布和攝取路徑;
定量分析抑制過程中的空間–時間變化。
2. 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激與鈣信號通路成像
鈣穩(wěn)態(tài)的破壞是誘導多種細胞應激、細胞死亡或自噬過程的重要因素。通過 CY5?Thapsigargin:
可觀察 ER 內(nèi)鈣儲量變化;
可結合鈣敏感熒光探針監(jiān)測鈣信號;
可研究內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激誘導的細胞病理過程。
3. 藥物篩選與作用機制分析
在藥物中,CY5?Thapsigargin 可作為工具分子:
評估候選小分子對 SERCA 抑制效應的干預;
闡明鈣通路干擾對細胞功能的影響;
與高通量篩選結合進行藥效評估或毒性分析。
4. 多通道聯(lián)合成像研究
CY5?Thapsigargin 遠紅譜的光學信號可與其他熒光探針結合:
DAPI(細胞核);
FITC/TRITC(內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體探針);
鈣指示劑(如 Fluo?4);
多通道成像可同時觀察多個細胞結構或信號通路,提高實驗信息量。
五、產(chǎn)品規(guī)格與質(zhì)量保證
規(guī)格型號 產(chǎn)品編號 純度 儲存條件
1?mg CY5?TG?01 ≥95?%(HPLC) –20?℃ 避光保存
5?mg CY5?TG?05 ≥95?%(HPLC) –20?℃ 避光保存
定制規(guī)格 CY5?TG?CUST ≥98?% 可商議
質(zhì)量控制流程:
HPLC 純度檢測:確保產(chǎn)品主峰 ≥95?%;
MS/HRMS 結構確認:驗證分子量及共價連接情況;
UV?Vis/熒光光譜分析:確認 CY5 發(fā)射特性與光學性能;
功能試驗驗證:檢測與 SERCA 結合能力與細胞成像效果。
六、實驗使用指南
為獲得穩(wěn)定可靠的數(shù)據(jù)表現(xiàn),推薦如下實驗操作:
1. 儲備液配制
將固體產(chǎn)品溶于適宜溶劑(如 DMSO)配制成高濃度儲備液(例如 1–5?mM);
避免長時間光照;
分裝保存,避免重復凍融。
2. 細胞處理與成像
在細胞培養(yǎng)體系中將探針終濃度調(diào)整至合適范圍(如 100–500?nM),根據(jù)細胞類型與實驗需求優(yōu)化;
孵育時間可從幾分鐘到數(shù)小時;
使用共聚焦顯微鏡或多光子顯微鏡在遠紅通道采集圖像;
可結合鈣敏感探針(如 Fluo?4)進行共定位分析。
七、優(yōu)勢與特色總結
1. 直觀定位與動態(tài)追蹤
CY5?Thapsigargin 能夠在細胞或組織樣本中清晰顯示其分布位置,為研究 SERCA 結合位點、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣穩(wěn)態(tài)變化以及藥物反應機制提供直觀圖像。
2. 多功能實驗適配性
遠紅熒光信號、穩(wěn)定共價結構、高細胞兼容性等特性使其適配多種成像平臺和實驗體系。
3. 與其他標記兼容
可與常用熒光探針、鈣指示劑、細胞器探針聯(lián)合使用,多通道成像將實驗信息維度大幅提升。
八、注意事項與建議
為確保實驗數(shù)據(jù)質(zhì)量,應注意以下事項:
光漂白防護:盡量避免探針暴露于高強度光線下,以延長熒光信號穩(wěn)定性;
對照設置:設置無探針對照以及自由 CY5 染料對照以排除非特異性信號;
濃度優(yōu)化:不同細胞類型對 Thapsigargin 的敏感性不同,建議先行優(yōu)化使用濃度;
儲存條件:避免潮解、高溫與光照,建議 –20?℃ 干燥避光保存。
九、總結
CY5?Thapsigargin(CY5?毒胡蘿卜素) 是一種集高性能光學信號與生物功能活性于一體的熒光探針。它通過將遠紅熒光分子 CY5 共價偶聯(lián)到 SERCA 抑制劑 Thapsigargin 上,使研究人員可以在顯微成像和藥物機制分析中直觀、動態(tài)地觀察鈣穩(wěn)態(tài)調(diào)控、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激反應、鈣通路干擾等生物過程,是細胞生物學、信號通路研究和藥物領域的理想工具。
西安齊岳生物科技有限公司提供專業(yè)的熒光標記服務與定制解決方案,致力于滿足科研與應用領域?qū)Ω咝阅軣晒鈽擞洰a(chǎn)品的需求。公司可針對蛋白質(zhì)、肽、多糖、小分子化合物以及納米材料進行高效、穩(wěn)定的熒光修飾,涵蓋從可見光到近紅外 NIR)范圍的多種熒光染料,如FITC、Cy3、Cy5、Cy5.5及Cy7等。
齊岳生物在標記過程中充分考慮分子特性與功能活性,通過共價偶聯(lián)或特定位點修飾實現(xiàn)高標記率與信號穩(wěn)定性。針對客戶的個性化需求,公司可提供從分子設計、標記反應、產(chǎn)物純化到質(zhì)量檢測的全流程定制服務,并通過嚴格的質(zhì)量控制確保每批產(chǎn)品的純度、標記效率及生物活性均符合科研標準。
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