3-IAA-FITC FITC標(biāo)記3-吲哚乙酸 熒光染料標(biāo)記3-吲哚乙酸
產(chǎn)品名稱:3-IAA-FITC FITC標(biāo)記3-吲哚乙酸 熒光染料標(biāo)記3-吲哚乙酸
產(chǎn)品描述:
3-IAA-FITC FITC標(biāo)記3-吲哚乙酸 熒光染料標(biāo)記3-吲哚乙酸
一、產(chǎn)品概述
3-IAA-FITC 是以植物天然生長素 3-吲哚乙酸(Indole-3-acetic acid, IAA) 為核心結(jié)構(gòu),通過共價偶聯(lián)熒光染料 FITC(Fluorescein Isothiocyanate,異硫氰酸熒光素) 制備而成的熒光標(biāo)記小分子探針。該產(chǎn)品在保持 IAA 基本生物活性的基礎(chǔ)上,引入綠色熒光信號,實現(xiàn)對生長素分布、轉(zhuǎn)運及受體結(jié)合過程的可視化研究。
3-吲哚乙酸是重要的天然植物生長素(Auxin),廣泛參與植物細(xì)胞伸長、分裂、分化、性運輸、頂端優(yōu)勢形成及重力響應(yīng)等關(guān)鍵生命活動。傳統(tǒng)IAA檢測依賴色譜或免疫方法,難以進(jìn)行實時動態(tài)觀察。3-IAA-FITC 的為植物激素動態(tài)追蹤提供了高靈敏度熒光解決方案。
二、分子結(jié)構(gòu)與組成
3-IAA-FITC 由兩個功能模塊構(gòu)成:
生物活性部分 —— 3-吲哚乙酸(IAA)
吲哚環(huán)結(jié)構(gòu)
乙酸側(cè)鏈
具有典型生長素活性
可與TIR1/AFB等受體蛋白結(jié)合
熒光報告部分 —— FITC
激發(fā)波長:約 488 nm
發(fā)射波長:約 520–525 nm
高量子產(chǎn)率
強(qiáng)綠色熒光
適用于共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞儀、熒光酶標(biāo)儀
FITC 通常通過異硫氰酸基團(tuán)(-N=C=S)與 IAA 分子中的可反應(yīng)基團(tuán)形成穩(wěn)定的硫脲鍵或酰胺鍵,從而實現(xiàn)共價標(biāo)記。
三、產(chǎn)品理化性質(zhì)
項目 參數(shù)說明
外觀 黃色至橙黃色固體或凍干粉
分子量 根據(jù)連接方式略有差異
溶解性 可溶于DMSO、DMF,部分可溶于水
儲存條件 -20℃避光保存
穩(wěn)定性 避光條件下穩(wěn)定
熒光顏色 綠色熒光
四、產(chǎn)品設(shè)計原理
在設(shè)計3-IAA-FITC時,需兼顧兩個核心目標(biāo):
① 保留IAA生物活性
IAA的吲哚環(huán)與乙酸側(cè)鏈?zhǔn)瞧渖锕δ荜P(guān)鍵區(qū)域,標(biāo)記時避免破壞關(guān)鍵結(jié)合位點,保證其仍可與生長素受體結(jié)合。
② 提供可視化信號
FITC具有:
高靈敏度
成熟檢測系統(tǒng)
與GFP通道兼容
成本相對較低
因此,3-IAA-FITC成為研究植物激素信號的理想熒光探針。
五、主要應(yīng)用方向
植物組織熒光定位
利用共聚焦顯微鏡觀察:
根尖區(qū)域IAA分布
維管束運輸路徑
側(cè)根形成區(qū)域
組織性運輸方向
Auxin轉(zhuǎn)運機(jī)制研究
可用于研究:
PIN蛋白介導(dǎo)的性運輸
AUX1/LAX轉(zhuǎn)運體功能
激素梯度形成機(jī)制
受體結(jié)合分析
通過熒光變化檢測:
IAA與TIR1/AFB受體結(jié)合
競爭性抑制實驗
結(jié)合動力學(xué)分析
熒光定量檢測
可用于:
熒光酶標(biāo)儀檢測
流式細(xì)胞分析
高通量篩選實驗
信號通路研究
結(jié)合基因突變株:
分析auxin信號通路變化
研究生長素調(diào)控網(wǎng)絡(luò)
驗證下游基因表達(dá)響應(yīng)
六、實驗使用建議
配制方法
使用無水DMSO配制1–10 mM儲備液
分裝避光保存
工作濃度通常 0.1–10 μM
成像參數(shù)
激發(fā):488 nm激光
發(fā)射采集:500–550 nm
建議使用FITC濾光片組
對照設(shè)置
未標(biāo)記IAA對照
FITC單獨對照
空白背景對照
進(jìn)行熒光強(qiáng)度分析與定位研究。
七、產(chǎn)品優(yōu)勢
優(yōu)勢 說明
可視化強(qiáng) 綠色熒光直觀清晰
技術(shù)成熟 FITC檢測系統(tǒng)廣泛應(yīng)用
靈敏度高 可檢測低濃度信號
操作簡便 常規(guī)熒光設(shè)備即可使用
兼容性好 與多種熒光通道匹配
八、注意事項
FITC易光漂白,實驗過程需避光操作。
溶解時避免高溫。
避免反復(fù)凍融。
注意DMSO終濃度控制。
長時間強(qiáng)光照射會降低熒光強(qiáng)度。
九、典型應(yīng)用示例
擬南芥根尖IAA動態(tài)成像
側(cè)根發(fā)育區(qū)域熒光分布分析
PIN蛋白突變體中IAA運輸研究
生長素競爭抑制劑篩選
十、總結(jié)
3-IAA-FITC 是一種將天然植物生長素與經(jīng)典綠色熒光染料相結(jié)合的功能型熒光探針。它兼具生物活性與高靈敏度熒光檢測能力,能夠?qū)崿F(xiàn)植物激素在細(xì)胞和組織中的實時可視化分析。該產(chǎn)品廣泛適用于植物分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)研究及高通量篩選等領(lǐng)域,是研究auxin生物學(xué)機(jī)制的重要工具分子。
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