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RhodamineB-PEG-Transferrin RB-PEG-Transferrin 羅丹明B-聚乙二醇-轉(zhuǎn)鐵蛋白
文章來源 : 齊岳生物
作者:小編zyl
發(fā)布時(shí)間 : 2026-03-16 14:27:23
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產(chǎn)品名稱:RhodamineB-PEG-Transferrin RB-PEG-Transferrin 羅丹明B-聚乙二醇-轉(zhuǎn)鐵蛋白
產(chǎn)品描述:
RhodamineB-PEG-Transferrin RB-PEG-Transferrin 羅丹明B-聚乙二醇-轉(zhuǎn)鐵蛋白
一、產(chǎn)品概述
RhodamineB-PEG-Transferrin(RB-PEG-Transferrin) 是一種將 羅丹明B(Rhodamine B)熒光染料 通過 聚乙二醇(PEG) 連接并共價(jià)偶聯(lián)到 轉(zhuǎn)鐵蛋白(Transferrin, Tf) 的多功能熒光標(biāo)記蛋白。轉(zhuǎn)鐵蛋白是一種天然鐵結(jié)合蛋白,廣泛存在于血漿中,主要功能是 運(yùn)送鐵離子至組織與細(xì)胞。通過將熒光染料與轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合,RB-PEG-Transferrin 能夠在保持蛋白生物活性的同時(shí)提供穩(wěn)定的 橙紅色熒光信號(hào),適用于 細(xì)胞攝取研究、受體介導(dǎo)的內(nèi)吞研究、靶向藥物遞送以及生物成像 等應(yīng)用。
羅丹明B是一種廣泛使用的熒光染料,其激發(fā)波長(zhǎng)約為 540–560 nm,發(fā)射波長(zhǎng)約為 570–590 nm,光穩(wěn)定性好,量子產(chǎn)率高,能夠在復(fù)雜生物體系中提供明亮且可追蹤的熒光信號(hào)。通過 PEG 的引入,不僅可以增加蛋白分子的水溶性和生物穩(wěn)定性,還能降低熒光染料對(duì)蛋白構(gòu)象的干擾,確保轉(zhuǎn)鐵蛋白的受體結(jié)合能力不受影響。
RB-PEG-Transferrin 因其高特異性和可視化能力,成為生命科學(xué)和藥物研發(fā)領(lǐng)域中 靶向研究和納米遞送系統(tǒng)設(shè)計(jì)的重要工具。
二、分子結(jié)構(gòu)與設(shè)計(jì)原理
RB-PEG-Transferrin 的結(jié)構(gòu)主要由三個(gè)功能模塊組成:
羅丹明B熒光模塊
提供明亮穩(wěn)定的橙紅色熒光信號(hào),適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡和流式細(xì)胞儀等檢測(cè)平臺(tái)。
PEG連接模塊
PEG 分子作為柔性連接臂,增加整體水溶性,改善蛋白在溶液中的穩(wěn)定性,同時(shí)降低染料對(duì)蛋白活性的空間干擾。
轉(zhuǎn)鐵蛋白功能模塊
轉(zhuǎn)鐵蛋白是一種天然鐵結(jié)合蛋白,含有高親和力的鐵結(jié)合位點(diǎn)和受體結(jié)合位點(diǎn),可通過受體介導(dǎo)被細(xì)胞攝取。
設(shè)計(jì)原理基于 PEG作為緩沖連接臂,將熒光染料與蛋白之間保持合理距離,從而 兼顧熒光性能和蛋白功能性。這種結(jié)構(gòu)使 RB-PEG-Transferrin 能在不影響 Tf 受體結(jié)合活性的前提下,實(shí)現(xiàn)可視化追蹤。
三、制備方法
RB-PEG-Transferrin 的合成通常分為三步:
1. 羅丹明B活化
羅丹明B通過活化形成 RhodamineB-NHS ester 或 RhodamineB-COOH,以提供反應(yīng)活性位點(diǎn),用于與 PEG 分子末端的氨基或羥基結(jié)合。
2. RB-PEG中間體形成
活化的羅丹明B與 NH?-PEG-NHS 或 MAL-PEG-NH? 在適當(dāng)溶劑(如 DMF、DMSO)中反應(yīng)生成 RB-PEG 中間體。
在此過程中需避光操作,以防熒光染料光降解。
3. RB-PEG與轉(zhuǎn)鐵蛋白偶聯(lián)
將 RB-PEG 中間體加入轉(zhuǎn)鐵蛋白溶液中,在緩沖液條件下(如 PBS 或碳酸鹽緩沖液,pH 7.4–8.5)進(jìn)行偶聯(lián)。
PEG 末端的活性基團(tuán)可與轉(zhuǎn)鐵蛋白表面的 賴氨酸殘基氨基或巰基 形成共價(jià)鍵,生成 RB-PEG-Transferrin。
4. 純化與表征
透析或凝膠過濾層析:去除未反應(yīng)的染料和小分子雜質(zhì)。
SDS-PAGE、電泳分析:確認(rèn)蛋白分子完整性。
紫外-可見和熒光光譜:驗(yàn)證熒光標(biāo)記成功及標(biāo)記度(DOL, Degree of Labeling)。
通過這些方法可確保 RB-PEG-Transferrin 高純度、功能性和熒光性能穩(wěn)定。
四、理化性質(zhì)
激發(fā)波長(zhǎng)(Ex):540–560 nm
發(fā)射波長(zhǎng)(Em):570–590 nm
外觀:橙紅色凍干粉末
溶解性:可溶于 PBS、Tris緩沖液等水溶液
儲(chǔ)存條件:?20℃,避光保存
穩(wěn)定性:避免反復(fù)凍融和強(qiáng)光照射
RB-PEG-Transferrin 在水溶液中穩(wěn)定,熒光信號(hào)強(qiáng)且持續(xù)時(shí)間長(zhǎng),適合長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)使用。
五、產(chǎn)品特點(diǎn)
強(qiáng)熒光信號(hào):羅丹明B量子產(chǎn)率高,提供明亮可追蹤信號(hào)。
PEG提升穩(wěn)定性:PEG緩沖連接降低蛋白聚集,提高水溶性和生物穩(wěn)定性。
保留蛋白功能:PEG間隔設(shè)計(jì)確保轉(zhuǎn)鐵蛋白的受體結(jié)合能力不受影響。
適用多種熒光平臺(tái):可在熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞儀等平臺(tái)檢測(cè)。
多功能研究工具:既可用于蛋白追蹤,也可作為藥物遞送系統(tǒng)的靶向載體模型。
六、主要應(yīng)用領(lǐng)域
1. 受體介導(dǎo)的細(xì)胞攝取研究
轉(zhuǎn)鐵蛋白可以通過 Tf受體介導(dǎo)內(nèi)吞 被多種細(xì)胞攝取,RB-PEG-Transferrin 可用于追蹤該過程,評(píng)估受體表達(dá)水平及內(nèi)吞動(dòng)力學(xué)。
2. 藥物遞送與納米載體研究
RB-PEG-Transferrin 可作為 靶向蛋白模型,研究藥物或納米顆粒在細(xì)胞中的攝取和定位,為靶向藥物設(shè)計(jì)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
3. 細(xì)胞成像與共聚焦顯微鏡研究
通過橙紅色熒光信號(hào),可直觀觀察轉(zhuǎn)鐵蛋白在細(xì)胞或組織中的分布,實(shí)現(xiàn)活體或體外成像。
4. 生物材料蛋白吸附研究
用于評(píng)估材料表面對(duì)蛋白的吸附行為,特別是在生物醫(yī)學(xué)材料和器械表面研究中。
5. 熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)和定量分析
RB-PEG-Transferrin 可用于細(xì)胞內(nèi)外蛋白定位定量實(shí)驗(yàn),或作為熒光對(duì)照和校正標(biāo)準(zhǔn)。
七、實(shí)驗(yàn)使用建議
避光操作:操作和儲(chǔ)存需避光,以保證熒光穩(wěn)定性。
緩沖液選擇:建議使用 PBS 或 Tris 緩沖液,避免含游離氨基的緩沖液影響標(biāo)記穩(wěn)定性。
分裝保存:凍干分裝可提高長(zhǎng)期穩(wěn)定性。
溫度控制:實(shí)驗(yàn)時(shí)根據(jù)細(xì)胞或蛋白體系選擇適宜溫度。
優(yōu)化實(shí)驗(yàn)濃度:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)節(jié)工作濃度,確保信號(hào)可檢測(cè)且蛋白活性不受影響。
八、總結(jié)
RhodamineB-PEG-Transferrin 是一種結(jié)合 熒光染料、PEG及轉(zhuǎn)鐵蛋白 的多功能熒光標(biāo)記蛋白。通過 PEG 緩沖連接,保證了熒光性能和蛋白活性的平衡。其亮麗橙紅色熒光信號(hào)、高生物穩(wěn)定性和保留的受體結(jié)合能力,使其成為 細(xì)胞成像、受體介導(dǎo)攝取研究、靶向遞送系統(tǒng)評(píng)估以及生物材料研究 的理想工具。
憑借高特異性和可靠性,RB-PEG-Transferrin 已成為 生命科學(xué)研究和納米醫(yī)學(xué)中不可或缺的熒光標(biāo)記工具,能夠直觀、高效地輔助科學(xué)家觀察蛋白行為和分子相互作用。
西安齊岳生物科技有限公司提供專業(yè)的熒光標(biāo)記服務(wù)與定制解決方案,致力于滿足科研與應(yīng)用領(lǐng)域?qū)Ω咝阅軣晒鈽?biāo)記產(chǎn)品的需求。公司可針對(duì)蛋白質(zhì)、肽、多糖、小分子化合物以及納米材料進(jìn)行高效、穩(wěn)定的熒光修飾,涵蓋從可見光到近紅外 NIR)范圍的多種熒光染料,如FITC、Cy3、Cy5、Cy5.5及Cy7等。
齊岳生物在標(biāo)記過程中充分考慮分子特性與功能活性,通過共價(jià)偶聯(lián)或特定位點(diǎn)修飾實(shí)現(xiàn)高標(biāo)記率與信號(hào)穩(wěn)定性。針對(duì)客戶的個(gè)性化需求,公司可提供從分子設(shè)計(jì)、標(biāo)記反應(yīng)、產(chǎn)物純化到質(zhì)量檢測(cè)的全流程定制服務(wù),并通過嚴(yán)格的質(zhì)量控制確保每批產(chǎn)品的純度、標(biāo)記效率及生物活性均符合科研標(biāo)準(zhǔn)。
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