產品名稱：FITC-Transferrin Fluorescein Isothiocyanate-Transferrin 熒光素標記轉鐵蛋白

產品描述：

FITC-Transferrin Fluorescein Isothiocyanate-Transferrin 熒光素標記轉鐵蛋白

一、產品概述

FITC-Transferrin 是一種將 熒光素異硫氰酸酯（FITC, Fluorescein Isothiocyanate） 與 轉鐵蛋白（Transferrin, Tf） 共價偶聯(lián)的高性能熒光標記蛋白。轉鐵蛋白是一種天然鐵離子結合糖蛋白，主要存在于血漿中，負責體內鐵離子的運輸，并能被多種細胞表面轉鐵蛋白受體（TfR）識別，實現(xiàn)受體介導的內吞。

通過 FITC 標記，轉鐵蛋白獲得了 明亮的綠色熒光信號（激發(fā)波長約 495 nm，發(fā)射波長約 520 nm），可直接用于 細胞成像、流式細胞術、受體結合研究、蛋白動力學分析及納米遞送系統(tǒng)追蹤 等實驗。FITC-Transferrin 結合了 天然蛋白功能與熒光可視化特性，為科研實驗提供高靈敏度和高可視化的研究工具。

二、分子結構與標記原理

FITC-Transferrin 的分子結構主要由三個部分組成：

熒光模塊（FITC）

FITC 是一種綠色熒光染料，激發(fā)波長 495 nm，發(fā)射波長 520 nm。

光穩(wěn)定性良好，量子產率高，可提供明亮的綠色熒光信號。

蛋白模塊（Transferrin）

轉鐵蛋白作為天然鐵載體，具有高親和力的鐵結合位點和受體結合能力。

可被多種細胞通過 TfR 介導內吞，實現(xiàn)靶向遞送和功能研究。

化學連接模塊

FITC 通過異硫氰酸基團與轉鐵蛋白的賴氨酸氨基共價結合，形成穩(wěn)定的硫代脲鍵。

偶聯(lián)過程中控制染料與蛋白摩爾比，可保證熒光強度與蛋白功能兼顧。

這種結構設計確保了 FITC-Transferrin 熒光信號強烈、蛋白功能保留、結構穩(wěn)定，可用于多種實驗體系。

三、制備方法

FITC-Transferrin 的制備一般包括以下步驟：

1. 熒光染料活化

選用 FITC 異硫氰酸酯形式，使其可以與蛋白氨基共價結合。

活化后的 FITC 在緩沖液中可直接參與蛋白偶聯(lián)反應。

2. 偶聯(lián)反應

將 FITC 與轉鐵蛋白在碳酸鹽緩沖液（pH 8.0–8.5）或 PBS 中混合。

異硫氰酸基團與轉鐵蛋白賴氨酸氨基反應，形成穩(wěn)定硫代脲鍵。

反應需低溫（4°C）并避光進行，以保持蛋白活性和熒光穩(wěn)定性。

3. 純化

采用透析、凝膠過濾或超濾去除未反應的 FITC。

得到高純度 FITC-Transferrin，保持蛋白完整性和熒光特性。

4. 表征

紫外-可見光譜：確認 FITC 特征吸收峰（約 495 nm）

熒光光譜：發(fā)射峰約 520 nm

SDS-PAGE：檢測蛋白完整性

標記度（DOL）：確定平均每個轉鐵蛋白分子上的 FITC 數量

通過這些表征方法，可確保 FITC-Transferrin 的熒光性能、蛋白活性及純度達到實驗標準。

四、理化性質

激發(fā)波長（Ex）：約 495 nm

發(fā)射波長（Em）：約 520 nm

外觀：淺綠色凍干粉末或溶液

溶解性：可溶于 PBS、Tris 緩沖液及水性溶液

儲存條件：?20℃ 避光保存

穩(wěn)定性：低溫避光條件下熒光和蛋白活性穩(wěn)定

FITC-Transferrin 在水溶液中可長期儲存，熒光信號穩(wěn)定可靠，適合多種實驗應用。

五、產品特點

綠色明亮熒光：FITC 提供清晰可視的綠色信號，適合細胞和組織觀察。

保留蛋白功能：轉鐵蛋白的 TfR 結合能力和鐵結合能力保持完整。

多用途應用：適用于流式細胞術、免疫熒光、細胞攝取研究及蛋白示蹤。

光穩(wěn)定性良好：在實驗操作中*光漂白，可進行長時間成像。

高純度與低非特異性吸附：保證實驗信號可靠、特異性高。

六、主要應用領域

1. 受體介導內吞研究

FITC-Transferrin 可用于研究 TfR 介導的轉鐵蛋白攝取及動力學分析。

可在細胞、腦內皮細胞和免疫細胞中追蹤 Tf 進入細胞過程。

2. 細胞成像與共聚焦顯微鏡

可用于觀察轉鐵蛋白在細胞內分布和運輸軌跡。

FITC 的綠色熒光便于與其他熒光通道（如 Cy3、Cy5）聯(lián)合成像。

3. 流式細胞術

用作熒光標記探針，定量分析細胞表面 TfR 表達水平。

可用于多色免疫分析，實現(xiàn)高通量細胞檢測。

4. 蛋白動力學與示蹤

適用于轉鐵蛋白吸收、運輸及降解過程研究。

可用于評估蛋白質遞送系統(tǒng)或納米顆粒的靶向能力。

5. 生物醫(yī)學研究

可作為靶向分子研究腦靶向遞送、靶向策略及免疫調控研究。

七、實驗使用建議

避光操作：FITC 對光敏感，操作和儲存需避光。

緩沖液選擇：推薦 PBS 或 Tris，避免強還原劑或高濃度游離氨基。

溫度控制：低溫（4℃）可維持蛋白結構和熒光性能。

濃度優(yōu)化：根據實驗類型調整工作濃度，確保信號清晰且蛋白功能不受影響。

分裝儲存：凍干分裝可延長產品壽命，避免反復凍融。

八、總結

FITC-Transferrin（熒光素異硫氰酸酯標記轉鐵蛋白） 是結合 轉鐵蛋白天然功能與綠色熒光可視化特性 的高性能標記蛋白。通過 FITC 的綠色熒光示蹤，可在體外和體內研究轉鐵蛋白的攝取、分布及運輸過程，同時保留蛋白本身的鐵結合及受體結合功能。

憑借 明亮綠色熒光、高光穩(wěn)定性、蛋白功能完整及多用途應用，F(xiàn)ITC-Transferrin 廣泛應用于 細胞成像、流式細胞術、受體介導內吞研究、蛋白動力學及納米藥物遞送研究，為生命科學研究提供可靠、可視化的實驗工具，助力科研和藥物工作。

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