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FITC-HSA 熒光素標(biāo)記人血清白蛋白 FITC標(biāo)記人血清白蛋白
文章來源 : 齊岳生物
作者:小編zyl
發(fā)布時(shí)間 : 2026-03-16 14:32:52
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產(chǎn)品名稱:FITC-HSA 熒光素標(biāo)記人血清白蛋白 FITC標(biāo)記人血清白蛋白
產(chǎn)品描述:
FITC-HSA 熒光素標(biāo)記人血清白蛋白 FITC標(biāo)記人血清白蛋白
一、產(chǎn)品概述
FITC-HSA 是將 熒光素異硫氰酸酯(FITC, Fluorescein Isothiocyanate) 與 人血清白蛋白(Human Serum Albumin, HSA) 共價(jià)偶聯(lián)的高性能熒光標(biāo)記蛋白。HSA 是人體血漿中含量豐富的蛋白質(zhì),主要功能包括 維持血漿膠體滲透壓、運(yùn)輸小分子藥物及脂溶性物質(zhì)、*氧化作用 等。
通過 FITC 標(biāo)記,HSA 獲得明亮的綠色熒光信號(激發(fā)波長約 495 nm,發(fā)射波長約 520 nm),在 細(xì)胞攝取研究、蛋白動(dòng)力學(xué)分析、流式細(xì)胞術(shù)、藥物載體示蹤、納米材料表征及組織成像 等實(shí)驗(yàn)中具有廣泛應(yīng)用。FITC-HSA 結(jié)合了 天然蛋白的生物功能與熒光可視化特性,為科研實(shí)驗(yàn)提供高靈敏度、可定量的研究工具。
二、分子結(jié)構(gòu)與標(biāo)記原理
FITC-HSA 分子結(jié)構(gòu)主要包括三個(gè)部分:
熒光模塊(FITC)
FITC 是一種綠色熒光染料,激發(fā)波長約 495 nm,發(fā)射波長約 520 nm。
光穩(wěn)定性好、量子產(chǎn)率高,適合長期成像實(shí)驗(yàn)。
蛋白模塊(HSA)
HSA 具有豐富的賴氨酸氨基和半胱氨酸巰基,可與小分子結(jié)合。
其天然生物功能使其在藥物載體研究、蛋白動(dòng)力學(xué)及血管遞送研究中非常有用。
化學(xué)連接模塊
FITC 通過異硫氰酸酯基團(tuán)與 HSA 的賴氨酸氨基共價(jià)結(jié)合,形成穩(wěn)定的硫代脲鍵。
偶聯(lián)過程中可通過調(diào)節(jié)染料與蛋白摩爾比,確保熒光信號強(qiáng)度與蛋白功能兼顧。
這種設(shè)計(jì)保證了 FITC-HSA 熒光強(qiáng)、蛋白功能保持、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,適用于多種體外與體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。
三、制備方法
FITC-HSA 的制備一般包括以下步驟:
1. 熒光染料活化
選用 FITC 異硫氰酸酯形式,使其能夠與蛋白氨基共價(jià)結(jié)合。
2. 偶聯(lián)反應(yīng)
在碳酸鹽緩沖液(pH 8.0–8.5)或 PBS 中,將 FITC 與 HSA 混合。
異硫氰酸基團(tuán)與 HSA 表面的賴氨酸氨基反應(yīng),形成穩(wěn)定硫代脲鍵。
反應(yīng)一般在低溫(4℃)和避光條件下進(jìn)行,以保持蛋白活性及熒光性能。
3. 純化
使用透析、凝膠過濾或超濾去除未反應(yīng)的 FITC。
得到高純度的 FITC-HSA,確保蛋白完整性及熒光特性。
4. 表征
紫外-可見光譜:FITC 特征吸收峰約 495 nm
熒光光譜:發(fā)射峰約 520 nm
SDS-PAGE:檢測蛋白完整性
標(biāo)記度測定(DOL):確定每個(gè) HSA 分子上平均偶聯(lián)的 FITC 數(shù)量
通過這些分析方法,可確保 FITC-HSA 的熒光性能、蛋白活性及純度達(dá)到實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。
四、理化性質(zhì)
激發(fā)波長(Ex):約 495 nm
發(fā)射波長(Em):約 520 nm
外觀:淺綠色凍干粉末或溶液
溶解性:可溶于 PBS、Tris 緩沖液及水性溶液
儲(chǔ)存條件:?20℃ 避光
穩(wěn)定性:在低溫避光條件下熒光和蛋白活性穩(wěn)定
FITC-HSA 在水溶液和生物體系中均表現(xiàn)出優(yōu)良的穩(wěn)定性,適用于多種實(shí)驗(yàn)環(huán)境。
五、產(chǎn)品特點(diǎn)
明亮綠色熒光:FITC 提供清晰可視信號,適合細(xì)胞及組織觀察。
保留 HSA 功能:蛋白結(jié)構(gòu)及結(jié)合能力保持完整。
廣泛應(yīng)用:適用于流式細(xì)胞術(shù)、免疫熒光、藥物載體研究及蛋白示蹤。
光穩(wěn)定性好:*光漂白,適合長期實(shí)驗(yàn)和重復(fù)成像。
高純度低非特異性吸附:確保實(shí)驗(yàn)信號可靠,特異性高。
六、主要應(yīng)用領(lǐng)域
1. 藥物載體與納米遞送研究
FITC-HSA 可作為模型蛋白用于納米顆粒、蛋白載體和藥物遞送系統(tǒng)的示蹤研究。
可評估蛋白在血漿中的穩(wěn)定性及組織分布。
2. 細(xì)胞內(nèi)蛋白攝取研究
可用于研究 HSA 通過受體介導(dǎo)的內(nèi)吞及運(yùn)輸過程。
在細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和免疫細(xì)胞中追蹤 HSA 進(jìn)入細(xì)胞的動(dòng)力學(xué)。
3. 細(xì)胞成像與共聚焦顯微鏡
可觀察蛋白在細(xì)胞內(nèi)分布及亞細(xì)胞定位。
綠色熒光便于與其他熒光染料聯(lián)合成像,實(shí)現(xiàn)多通道分析。
4. 流式細(xì)胞術(shù)
可作為熒光探針,定量分析蛋白攝取及細(xì)胞表面結(jié)合情況。
5. 蛋白動(dòng)力學(xué)與示蹤
可用于 HSA 在血液、細(xì)胞或組織中的分布及降解研究。
有助于評估蛋白-藥物復(fù)合物或載體的靶向效率。
七、實(shí)驗(yàn)使用建議
避光操作:FITC 對光敏感,操作及儲(chǔ)存需避光。
緩沖液選擇:推薦 PBS 或 Tris,避免高濃度游離氨基或強(qiáng)還原劑。
溫度控制:低溫(4℃)操作可維持蛋白結(jié)構(gòu)和熒光性能。
濃度優(yōu)化:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整工作濃度,保證信號清晰且蛋白功能完整。
分裝儲(chǔ)存:凍干分裝可延長使用壽命,避免反復(fù)凍融。
八、總結(jié)
FITC-HSA(熒光素標(biāo)記人血清白蛋白) 是結(jié)合 HSA 天然功能與 FITC 綠色熒光特性 的高性能標(biāo)記蛋白。通過 FITC 的可視化信號,可在體外和體內(nèi)研究 HSA 的攝取、分布及運(yùn)輸,同時(shí)保留蛋白本身的結(jié)構(gòu)和功能。
憑借 明亮綠色熒光、光穩(wěn)定性強(qiáng)、蛋白功能完整及多用途應(yīng)用,F(xiàn)ITC-HSA 廣泛用于 細(xì)胞成像、流式細(xì)胞術(shù)、受體介導(dǎo)內(nèi)吞、蛋白動(dòng)力學(xué)、藥物載體及納米遞送研究,為生命科學(xué)研究和藥物提供了可靠、可視化的實(shí)驗(yàn)工具。
西安齊岳生物科技有限公司提供專業(yè)的熒光標(biāo)記服務(wù)與定制解決方案,致力于滿足科研與應(yīng)用領(lǐng)域?qū)Ω咝阅軣晒鈽?biāo)記產(chǎn)品的需求。公司可針對蛋白質(zhì)、肽、多糖、小分子化合物以及納米材料進(jìn)行高效、穩(wěn)定的熒光修飾,涵蓋從可見光到近紅外 NIR)范圍的多種熒光染料,如FITC、Cy3、Cy5、Cy5.5及Cy7等。
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