產(chǎn)品名稱：羅丹明-刀豆球蛋白A RB-ConA 羅丹明標(biāo)記刀豆球蛋白A

產(chǎn)品描述：

羅丹明-刀豆球蛋白A，RB-ConA,羅丹明標(biāo)記刀豆球蛋白A

一、產(chǎn)品概述

RB-ConA 是將 紅色熒光染料羅丹明 B（Rhodamine B, RB） 與 刀豆球蛋白A（Concanavalin A, ConA） 共價(jià)偶聯(lián)的熒光標(biāo)記蛋白。ConA 是一種來(lái)源于刀豆（Canavalia ensiformis）的植物凝集素，屬于四聚體糖蛋白，具有 特異性結(jié)合 α-D-甘露糖和 α-D-葡萄糖殘基 的能力，因此在細(xì)胞膜糖蛋白識(shí)別、糖鏈結(jié)構(gòu)分析及細(xì)胞表面糖受體研究中具有重要作用。

通過(guò)羅丹明 B 標(biāo)記，ConA 獲得 明亮紅色熒光信號(hào)（激發(fā)波長(zhǎng)約 540–555 nm，發(fā)射波長(zhǎng)約 565–580 nm），使其在 細(xì)胞成像、流式細(xì)胞術(shù)、糖蛋白識(shí)別及受體結(jié)合研究 中可視化、定量化。RB-ConA 結(jié)合了 ConA 的天然糖結(jié)合功能與羅丹明 B 的高亮熒光特性，為科研實(shí)驗(yàn)提供高靈敏度和可視化的研究工具。

二、分子結(jié)構(gòu)與標(biāo)記原理

RB-ConA 分子結(jié)構(gòu)主要由三部分組成：

熒光模塊（Rhodamine B）

羅丹明 B 是一種紅色熒光染料，激發(fā)波長(zhǎng)約 540–555 nm，發(fā)射波長(zhǎng)約 565–580 nm。

熒光強(qiáng)度高、光穩(wěn)定性良好，可實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)時(shí)間成像實(shí)驗(yàn)。

蛋白模塊（ConA）

ConA 為四聚體糖結(jié)合蛋白，特異性識(shí)別 α-D-甘露糖和 α-D-葡萄糖殘基。

在細(xì)胞膜糖蛋白識(shí)別、糖鏈分析及糖受體研究中具有廣泛應(yīng)用。

化學(xué)連接模塊

羅丹明 B 通過(guò)活化羧基（如 NHS ester）與 ConA 賴氨酸氨基共價(jià)偶聯(lián)，形成穩(wěn)定酰胺鍵。

偶聯(lián)過(guò)程中可調(diào)節(jié)染料與蛋白摩爾比，確保熒光強(qiáng)度與蛋白功能兼顧。

這種設(shè)計(jì)保證 RB-ConA 熒光信號(hào)明亮、糖結(jié)合功能保留、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，適用于多種體外與體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。

三、制備方法

RB-ConA 的制備一般包括以下步驟：

1. 羅丹明 B 活化

將羅丹明 B 轉(zhuǎn)化為 NHS ester 或 Sulfo-NHS ester，可與蛋白氨基形成穩(wěn)定共價(jià)鍵。

2. 偶聯(lián)反應(yīng)

在 PBS 或碳酸鹽緩沖液（pH 7.4–8.5）中，將活化的羅丹明 B 與 ConA 混合。

羰基酯與 ConA 賴氨酸氨基反應(yīng)，形成穩(wěn)定酰胺鍵。

反應(yīng)一般在低溫（4℃）和避光條件下進(jìn)行，以保護(hù)蛋白結(jié)構(gòu)和熒光性能。

3. 純化

通過(guò)透析、凝膠過(guò)濾或超濾去除未反應(yīng)的染料。

得到高純度 RB-ConA，保持蛋白完整性及熒光特性。

4. 表征

紫外-可見(jiàn)光譜：羅丹明 B 特征吸收峰約 540–555 nm

熒光光譜：發(fā)射峰約 565–580 nm

SDS-PAGE：檢測(cè)蛋白完整性

標(biāo)記度測(cè)定（DOL）：確定每個(gè) ConA 分子偶聯(lián)的染料數(shù)量

通過(guò)這些表征方法，可確保 RB-ConA 的熒光性能、蛋白活性及純度滿足實(shí)驗(yàn)要求。

四、理化性質(zhì)

激發(fā)波長(zhǎng)（Ex）：約 540–555 nm

發(fā)射波長(zhǎng)（Em）：約 565–580 nm

外觀：紅色凍干粉末或溶液

溶解性：可溶于 PBS、Tris 緩沖液及水性溶液

儲(chǔ)存條件：?20℃ 避光保存

穩(wěn)定性：低溫避光條件下熒光和蛋白功能穩(wěn)定

RB-ConA 在水溶液和生物體系中均表現(xiàn)出優(yōu)良的穩(wěn)定性，適合多種實(shí)驗(yàn)條件。

五、產(chǎn)品特點(diǎn)

紅色明亮熒光：便于細(xì)胞及組織觀察，適合與綠色熒光染料聯(lián)合成像。

保留糖結(jié)合功能：ConA 的 α-D-甘露糖及 α-D-葡萄糖結(jié)合能力完整。

多用途應(yīng)用：適用于細(xì)胞膜糖蛋白研究、流式細(xì)胞術(shù)、免疫熒光及蛋白示蹤。

光穩(wěn)定性好：*光漂白，可進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間成像實(shí)驗(yàn)。

高純度低非特異性吸附：實(shí)驗(yàn)信號(hào)可靠、特異性高。

六、主要應(yīng)用領(lǐng)域

1. 糖蛋白識(shí)別與細(xì)胞膜受體研究

RB-ConA 可特異性識(shí)別細(xì)胞膜表面的 α-D-甘露糖和 α-D-葡萄糖殘基。

可用于檢測(cè)糖蛋白分布、受體結(jié)合及細(xì)胞表面糖鏈分析。

2. 細(xì)胞成像與共聚焦顯微鏡

可觀察 ConA 在細(xì)胞膜或細(xì)胞內(nèi)分布情況。

紅色熒光與其他染料通道組合，可實(shí)現(xiàn)多通道成像。

3. 流式細(xì)胞術(shù)

可用于定量分析細(xì)胞表面糖受體表達(dá)水平。

可在多色流式體系中進(jìn)行糖蛋白檢測(cè)。

4. 蛋白動(dòng)力學(xué)與示蹤

可用于研究 ConA 在細(xì)胞或組織內(nèi)的攝取、運(yùn)輸及代謝過(guò)程。

有助于評(píng)估蛋白-受體相互作用和內(nèi)吞動(dòng)力學(xué)。

5. 生物材料及納米醫(yī)學(xué)研究

可用于評(píng)估糖蛋白與材料表面的結(jié)合及靶向能力。

七、實(shí)驗(yàn)使用建議

避光操作：羅丹明 B 對(duì)光敏感，實(shí)驗(yàn)操作需避光。

緩沖液選擇：推薦 PBS 或 Tris，避免含強(qiáng)還原劑或高濃度游離氨基。

溫度控制：低溫（4℃）操作可保持蛋白結(jié)構(gòu)及熒光性能。

濃度優(yōu)化：根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整工作濃度，保證信號(hào)清晰且糖結(jié)合功能完整。

分裝儲(chǔ)存：凍干分裝可延長(zhǎng)使用壽命，避免反復(fù)凍融。

八、總結(jié)

RB-ConA（羅丹明標(biāo)記刀豆球蛋白A） 是結(jié)合 ConA 天然糖結(jié)合功能與羅丹明 B 紅色熒光特性 的高性能熒光標(biāo)記蛋白。通過(guò)紅色熒光信號(hào)，可在體外研究 ConA 的糖蛋白識(shí)別、細(xì)胞膜結(jié)合及內(nèi)吞過(guò)程，同時(shí)保留蛋白的天然功能。

憑借 明亮紅色熒光、糖結(jié)合功能完整、光穩(wěn)定性好及多用途應(yīng)用，RB-ConA 廣泛應(yīng)用于 細(xì)胞膜糖蛋白研究、流式細(xì)胞術(shù)、共聚焦顯微鏡、蛋白動(dòng)力學(xué)及納米材料靶向研究，為生命科學(xué)和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)提供可靠、可視化的實(shí)驗(yàn)工具。

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