產(chǎn)品名稱：FITC-刀豆球蛋白A 異硫氰酸熒光素標(biāo)記刀豆球蛋白A FITC-ConA

產(chǎn)品描述：

FITC-刀豆球蛋白A，異硫氰酸熒光素標(biāo)記刀豆球蛋白A，F(xiàn)ITC-ConA

一、產(chǎn)品概述

FITC-ConA 是將 綠色熒光染料異硫氰酸熒光素（FITC, Fluorescein Isothiocyanate） 與 刀豆球蛋白A（Concanavalin A, ConA） 共價偶聯(lián)而形成的高性能熒光標(biāo)記蛋白。ConA 是一種來源于刀豆（Canavalia ensiformis）的植物凝集素，四聚體結(jié)構(gòu)中含有多個糖結(jié)合位點，能夠 特異性識別 α-D-甘露糖和 α-D-葡萄糖殘基。

通過 FITC 標(biāo)記，ConA 獲得 明亮的綠色熒光信號（激發(fā)波長約 495 nm，發(fā)射波長約 520 nm），適用于 細(xì)胞膜糖蛋白識別、流式細(xì)胞術(shù)、免疫熒光、多通道成像及蛋白動力學(xué)研究。FITC-ConA 結(jié)合了 ConA 的天然糖結(jié)合功能與 FITC 的高亮綠色熒光特性，為科研實驗提供可靠的可視化工具。

二、分子結(jié)構(gòu)與標(biāo)記原理

FITC-ConA 分子結(jié)構(gòu)由三個主要組成部分構(gòu)成：

熒光模塊（FITC）

FITC 是一種綠色熒光染料，激發(fā)波長約 495 nm，發(fā)射波長約 520 nm。

光穩(wěn)定性好、量子產(chǎn)率高，可進(jìn)行長期細(xì)胞成像及定量分析。

蛋白模塊（ConA）

ConA 是四聚體糖結(jié)合蛋白，特異性結(jié)合 α-D-甘露糖和 α-D-葡萄糖殘基。

廣泛用于糖鏈分析、糖蛋白識別及受體結(jié)合研究。

化學(xué)連接模塊

FITC 通過異硫氰酸基與 ConA 的賴氨酸氨基形成穩(wěn)定的硫代脲鍵。

可通過調(diào)節(jié)染料與蛋白的摩爾比，平衡熒光強度與蛋白功能，保證糖結(jié)合活性和結(jié)構(gòu)完整性。

這種設(shè)計保證了 FITC-ConA 熒光強、糖結(jié)合功能保留、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，適合多種體外實驗體系。

三、制備方法

FITC-ConA 的制備一般包括以下步驟：

1. 熒光染料活化

選用 FITC 異硫氰酸酯形式，使其能夠與蛋白賴氨酸氨基共價結(jié)合。

2. 偶聯(lián)反應(yīng)

在碳酸鹽緩沖液或 PBS（pH 8.0–8.5）中，將 FITC 與 ConA 混合。

異硫氰酸基團(tuán)與 ConA 的氨基反應(yīng)形成穩(wěn)定硫代脲鍵。

反應(yīng)在低溫（4℃）及避光條件下進(jìn)行，以保持蛋白活性及熒光性能。

3. 純化

使用透析、凝膠過濾或超濾去除未反應(yīng)的 FITC。

得到高純度 FITC-ConA，保證蛋白完整性和熒光強度。

4. 表征

紫外-可見光譜：FITC 特征吸收峰約 495 nm

熒光光譜：發(fā)射峰約 520 nm

SDS-PAGE：檢測蛋白完整性

標(biāo)記度測定（DOL）：計算平均每個 ConA 分子偶聯(lián)的 FITC 數(shù)量

這些表征方法確保 FITC-ConA 的熒光性能和蛋白功能達(dá)到科研實驗標(biāo)準(zhǔn)。

四、理化性質(zhì)

激發(fā)波長（Ex）：約 495 nm

發(fā)射波長（Em）：約 520 nm

外觀：淺綠色凍干粉末或溶液

溶解性：可溶于 PBS、Tris 緩沖液及水性溶液

儲存條件：?20℃ 避光

穩(wěn)定性：在低溫避光條件下，熒光和蛋白功能穩(wěn)定

FITC-ConA 在水溶液和生物體系中均具有良好的穩(wěn)定性，適用于多種實驗條件。

五、產(chǎn)品特點

明亮綠色熒光：適合細(xì)胞及組織觀察，便于與紅色熒光染料聯(lián)合成像。

保留糖結(jié)合功能：ConA 對 α-D-甘露糖及 α-D-葡萄糖的識別能力完整。

多用途應(yīng)用：適用于流式細(xì)胞術(shù)、免疫熒光、共聚焦顯微鏡、蛋白動力學(xué)研究及糖蛋白分析。

光穩(wěn)定性好：*光漂白，可進(jìn)行長時間成像實驗。

高純度低非特異性吸附：確保實驗信號可靠、特異性高。

六、主要應(yīng)用領(lǐng)域

1. 糖蛋白識別與受體結(jié)合研究

FITC-ConA 可特異性結(jié)合細(xì)胞表面 α-D-甘露糖和 α-D-葡萄糖殘基。

用于糖蛋白分布、受體表達(dá)及細(xì)胞表面糖鏈分析。

2. 細(xì)胞成像與共聚焦顯微鏡

可觀察 ConA 在細(xì)胞膜及細(xì)胞內(nèi)的分布情況。

綠色熒光可與紅色、近紅外熒光染料聯(lián)合成像，實現(xiàn)多通道分析。

3. 流式細(xì)胞術(shù)

可用于定量分析細(xì)胞表面糖受體表達(dá)水平及受體動態(tài)變化。

4. 蛋白動力學(xué)與示蹤

可用于研究 ConA 在細(xì)胞或組織內(nèi)的攝取、運輸及代謝過程。

有助于評估蛋白-受體相互作用和內(nèi)吞動力學(xué)。

5. 納米醫(yī)學(xué)及生物材料研究

可用于評估糖蛋白與材料表面結(jié)合及靶向能力。

七、實驗使用建議

避光操作：FITC 對光敏感，操作和儲存需避光。

緩沖液選擇：推薦 PBS 或 Tris，避免強還原劑或高濃度游離氨基。

溫度控制：低溫（4℃）操作可保持蛋白結(jié)構(gòu)及熒光性能。

濃度優(yōu)化：根據(jù)實驗需求調(diào)整工作濃度，確保信號清晰且糖結(jié)合功能完整。

分裝儲存：凍干分裝可延長使用壽命，避免反復(fù)凍融。

八、總結(jié)

FITC-ConA（異硫氰酸熒光素標(biāo)記刀豆球蛋白A） 是結(jié)合 ConA 天然糖結(jié)合功能與 FITC 明亮綠色熒光特性 的高性能標(biāo)記蛋白。通過綠色熒光信號，可在體外研究 ConA 的糖蛋白識別、細(xì)胞膜結(jié)合及內(nèi)吞過程，同時保持蛋白的天然功能。

憑借 明亮綠色熒光、糖結(jié)合功能完整、光穩(wěn)定性好及多用途應(yīng)用，F(xiàn)ITC-ConA 廣泛應(yīng)用于 細(xì)胞膜糖蛋白研究、流式細(xì)胞術(shù)、共聚焦顯微鏡、蛋白動力學(xué)及納米材料靶向研究，為生命科學(xué)和生物醫(yī)學(xué)實驗提供可靠、可視化的實驗工具。

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