產(chǎn)品名稱：CY5-Protein A Cyanine5-Protein A 花菁染料CY5標(biāo)記蛋白A

產(chǎn)品描述：

CY5-Protein A Cyanine5-Protein A 花菁染料CY5標(biāo)記蛋白A

一、產(chǎn)品概述

CY5-Protein A 是將 近紅外熒光染料 Cyanine5（CY5） 與 蛋白A（Protein A） 共價(jià)偶聯(lián)而形成的熒光標(biāo)記蛋白。Protein A 是一種來源于 金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus） 的細(xì)胞壁蛋白，具有高親和力結(jié)合 免疫球蛋白 Fc 區(qū)域 的能力，常用于 *體純化、免疫檢測及*體示蹤。

通過 CY5 標(biāo)記，Protein A 獲得 紅色近紅外熒光信號（激發(fā)波長約 650 nm，發(fā)射波長約 670 nm），可用于 熒光免疫檢測、流式細(xì)胞術(shù)、共聚焦顯微鏡及蛋白示蹤研究。CY5-Protein A 將 Protein A 的天然*體結(jié)合功能與 CY5 的高亮度熒光特性 相結(jié)合，為科研實(shí)驗(yàn)提供高靈敏度的可視化工具。

二、分子結(jié)構(gòu)與標(biāo)記原理

CY5-Protein A 分子結(jié)構(gòu)主要由三個(gè)組成部分構(gòu)成：

熒光模塊（Cyanine5, CY5）

CY5 是一種紅色至近紅外熒光染料，激發(fā)波長約 650 nm，發(fā)射波長約 670 nm。

光穩(wěn)定性好、量子產(chǎn)率高，可用于長時(shí)間成像和定量分析。

蛋白模塊（Protein A）

Protein A 能高效結(jié)合 IgG Fc 區(qū)域，常用于*體純化及免疫檢測。

保持天然三維結(jié)構(gòu)，確保*體結(jié)合功能完整。

化學(xué)連接模塊

CY5 通常通過 NHS ester 或 Sulfo-NHS ester 與 Protein A 的賴氨酸氨基共價(jià)結(jié)合，形成穩(wěn)定的酰胺鍵。

偶聯(lián)過程中可調(diào)節(jié)染料與蛋白摩爾比，以平衡熒光強(qiáng)度和蛋白活性，保證 Fc 區(qū)域結(jié)合能力不受影響。

這種設(shè)計(jì)確保 CY5-Protein A 熒光強(qiáng)、*體結(jié)合功能保留、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，適用于多種體外與體內(nèi)實(shí)驗(yàn)體系。

三、制備方法

CY5-Protein A 的制備一般包括以下步驟：

1. 熒光染料活化

選用 CY5 的 NHS ester 或 Sulfo-NHS ester 形式，使其能夠與蛋白賴氨酸氨基共價(jià)結(jié)合。

2. 偶聯(lián)反應(yīng)

在 PBS 或碳酸鹽緩沖液（pH 7.4–8.5）中，將活化的 CY5 與 Protein A 混合。

NHS 酯與 Protein A 氨基形成穩(wěn)定酰胺鍵。

反應(yīng)在低溫（4℃）和避光條件下進(jìn)行，以保持蛋白結(jié)構(gòu)和熒光性能。

3. 純化

采用透析、凝膠過濾或超濾去除未反應(yīng)的 CY5。

得到高純度 CY5-Protein A，保持蛋白完整性及熒光特性。

4. 表征

紫外-可見光譜：CY5 特征吸收峰約 650 nm

熒光光譜：發(fā)射峰約 670 nm

SDS-PAGE：檢測蛋白完整性

標(biāo)記度測定（DOL）：確定平均每個(gè) Protein A 分子偶聯(lián)的 CY5 數(shù)量

通過表征方法，可確保 CY5-Protein A 的熒光性能、蛋白活性及純度滿足實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。

四、理化性質(zhì)

激發(fā)波長（Ex）：約 650 nm

發(fā)射波長（Em）：約 670 nm

外觀：紅色至深紅色凍干粉末或溶液

溶解性：可溶于 PBS、Tris 緩沖液及水性溶液

儲(chǔ)存條件：?20℃ 避光保存

穩(wěn)定性：低溫避光條件下熒光和蛋白活性穩(wěn)定

CY5-Protein A 在水溶液和生物體系中均表現(xiàn)出優(yōu)良的穩(wěn)定性，適用于多種實(shí)驗(yàn)條件。

五、產(chǎn)品特點(diǎn)

紅色近紅外熒光：適合多通道共聚焦顯微鏡和流式細(xì)胞術(shù)，便于與綠色熒光染料組合。

保留*體結(jié)合功能：Protein A 能高效結(jié)合 IgG Fc 區(qū)域，適用于免疫檢測和*體示蹤。

多用途應(yīng)用：適用于*體純化、免疫成像、蛋白示蹤及流式細(xì)胞術(shù)。

光穩(wěn)定性好：*光漂白，可進(jìn)行長時(shí)間成像實(shí)驗(yàn)。

高純度低非特異性吸附：實(shí)驗(yàn)信號可靠、特異性高。

六、主要應(yīng)用領(lǐng)域

1. *體純化與免疫檢測

CY5-Protein A 可結(jié)合 Fc 區(qū)域，用于熒光免疫檢測及*體示蹤。

可在流式細(xì)胞術(shù)或共聚焦顯微鏡中直接觀察*體結(jié)合情況。

2. 細(xì)胞成像與共聚焦顯微鏡

可用于觀察*體-Protein A 復(fù)合物在細(xì)胞或組織中的分布。

紅色熒光可與其他染料組合實(shí)現(xiàn)多通道成像。

3. 流式細(xì)胞術(shù)

可用于定量分析*體結(jié)合情況及細(xì)胞表面*原分布。

4. 蛋白示蹤與動(dòng)力學(xué)研究

可用于 Protein A 在體外或體內(nèi)體系中的運(yùn)輸、攝取及代謝過程研究。

5. 納米醫(yī)學(xué)及生物材料研究

可用于評估蛋白與納米載體或生物材料的結(jié)合及靶向能力。

七、實(shí)驗(yàn)使用建議

避光操作：CY5 對光敏感，操作和儲(chǔ)存需避光。

緩沖液選擇：推薦 PBS 或 Tris，避免強(qiáng)還原劑或高濃度游離氨基。

溫度控制：低溫（4℃）操作可保持蛋白結(jié)構(gòu)及熒光性能。

濃度優(yōu)化：根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整工作濃度，保證信號清晰且蛋白結(jié)合功能完整。

分裝儲(chǔ)存：凍干分裝可延長使用壽命，避免反復(fù)凍融。

八、總結(jié)

CY5-Protein A（花菁染料 CY5 標(biāo)記蛋白A） 是結(jié)合 Protein A 天然*體結(jié)合功能與 CY5 紅色熒光特性 的高性能標(biāo)記蛋白。通過紅色熒光信號，可在體外研究*體-Protein A 相互作用、免疫復(fù)合物分布及蛋白示蹤，同時(shí)保留蛋白天然功能。

憑借 明亮紅色熒光、*體結(jié)合功能完整、光穩(wěn)定性好及多用途應(yīng)用，CY5-Protein A 廣泛應(yīng)用于 *體純化、免疫檢測、流式細(xì)胞術(shù)、共聚焦顯微鏡及蛋白示蹤研究，為生命科學(xué)和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)提供可靠、可視化的實(shí)驗(yàn)工具。

西安齊岳生物科技有限公司提供專業(yè)的熒光標(biāo)記服務(wù)與定制解決方案，致力于滿足科研與應(yīng)用領(lǐng)域?qū)Ω咝阅軣晒鈽?biāo)記產(chǎn)品的需求。公司可針對蛋白質(zhì)、肽、多糖、小分子化合物以及納米材料進(jìn)行高效、穩(wěn)定的熒光修飾，涵蓋從可見光到近紅外 NIR）范圍的多種熒光染料，如FITC、Cy3、Cy5、Cy5.5及Cy7等。

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