產(chǎn)品名稱：FITC-OVA 異硫氰酸熒光素標(biāo)記卵清蛋白 Ovalbumin-FITC

產(chǎn)品描述：

FITC-OVA 異硫氰酸熒光素標(biāo)記卵清蛋白 Ovalbumin-FITC 

一、產(chǎn)品概述

FITC-OVA 是將 綠色熒光染料異硫氰酸熒光素（FITC, Fluorescein Isothiocyanate） 與 卵清蛋白（Ovalbumin, OVA） 共價偶聯(lián)而制備的熒光標(biāo)記蛋白。OVA 是一種來源于雞蛋清的主要蛋白質(zhì)，分子量約 45 kDa，具有 良好的水溶性、穩(wěn)定性及免疫原性，廣泛用于 免疫學(xué)研究、*原示蹤及疫苗模型實驗。

通過 FITC 標(biāo)記，OVA 獲得 明亮綠色熒光信號（激發(fā)波長約 495 nm，發(fā)射波長約 520 nm），可在 細(xì)胞成像、流式細(xì)胞術(shù)、免疫反應(yīng)示蹤及*原動力學(xué)研究中實現(xiàn)可視化。FITC-OVA 結(jié)合了 OVA 的天然免疫原性與 FITC 的高亮綠色熒光特性，為生命科學(xué)實驗提供直觀可靠的工具。

二、分子結(jié)構(gòu)與標(biāo)記原理

FITC-OVA 分子結(jié)構(gòu)由三個主要部分組成：

熒光模塊（FITC）

FITC 是綠色熒光染料，激發(fā)波長約 495 nm，發(fā)射波長約 520 nm。

熒光亮度高、量子產(chǎn)率大，光穩(wěn)定性好，可進(jìn)行長時間觀察和定量分析。

蛋白模塊（OVA）

Ovalbumin 具有良好的溶解性和穩(wěn)定性，同時保留免疫原性，適合用于*原示蹤和免疫學(xué)研究。

可被*原遞呈細(xì)胞識別和處理，參與免疫反應(yīng)分析。

化學(xué)連接模塊

FITC 通過異硫氰酸基與 OVA 的賴氨酸氨基共價偶聯(lián)，形成穩(wěn)定的硫代脲鍵。

偶聯(lián)過程中可調(diào)節(jié)染料與蛋白摩爾比，保證熒光強(qiáng)度和蛋白功能兼顧。

該設(shè)計確保 FITC-OVA 熒光明亮、蛋白活性保留、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，適用于多種體外與體內(nèi)實驗體系。

三、制備方法

FITC-OVA 的制備一般包括以下步驟：

1. 熒光染料活化

使用 FITC 異硫氰酸酯形式，使其能夠與蛋白賴氨酸氨基共價結(jié)合。

2. 偶聯(lián)反應(yīng)

在碳酸鹽緩沖液或 PBS（pH 8.0–8.5）中，將 FITC 與 OVA 混合。

異硫氰酸基與 OVA 氨基形成穩(wěn)定的硫代脲鍵。

反應(yīng)在低溫（4℃）及避光條件下進(jìn)行，以保持蛋白結(jié)構(gòu)和熒光性能。

3. 純化

采用透析、凝膠過濾或超濾去除未反應(yīng)的 FITC。

得到高純度 FITC-OVA，保持蛋白完整性及熒光特性。

4. 表征

紫外-可見光譜：FITC 特征吸收峰約 495 nm

熒光光譜：發(fā)射峰約 520 nm

SDS-PAGE：檢測蛋白完整性

標(biāo)記度測定（DOL）：計算每個 OVA 分子偶聯(lián)的 FITC 數(shù)量

通過表征方法，可確保 FITC-OVA 的熒光性能和蛋白活性達(dá)到科研實驗標(biāo)準(zhǔn)。

四、理化性質(zhì)

激發(fā)波長（Ex）：約 495 nm

發(fā)射波長（Em）：約 520 nm

外觀：淺綠色凍干粉末或溶液

溶解性：可溶于 PBS、Tris 緩沖液及水性溶液

儲存條件：?20℃ 避光保存

穩(wěn)定性：低溫避光條件下熒光和蛋白功能穩(wěn)定

FITC-OVA 在水溶液和生物體系中表現(xiàn)出優(yōu)良的穩(wěn)定性，適用于多種實驗條件。

五、產(chǎn)品特點(diǎn)

明亮綠色熒光：便于細(xì)胞及組織觀察，可與紅色或近紅外熒光染料聯(lián)合成像。

保留免疫原性：OVA 的天然*原特性完整，可被*原遞呈細(xì)胞識別。

多用途應(yīng)用：適用于細(xì)胞成像、流式細(xì)胞術(shù)、免疫反應(yīng)示蹤及*原動力學(xué)研究。

光穩(wěn)定性好：*光漂白，可進(jìn)行長時間成像實驗。

高純度低非特異性吸附：實驗信號可靠、特異性高。

六、主要應(yīng)用領(lǐng)域

1. *原遞呈和免疫研究

FITC-OVA 可用于監(jiān)測*原在細(xì)胞內(nèi)的攝取和處理過程。

用于研究*原遞呈細(xì)胞（APC）的吞噬與*原加工機(jī)制。

2. 細(xì)胞成像與共聚焦顯微鏡

可直接觀察 OVA 在細(xì)胞膜、內(nèi)體及溶酶體中的分布。

與其他熒光通道組合，可進(jìn)行多通道成像分析。

3. 流式細(xì)胞術(shù)

可用于定量分析*原攝取效率、內(nèi)吞動力學(xué)及細(xì)胞免疫狀態(tài)。

4. 疫苗與免疫反應(yīng)研究

可用于模擬*原在體內(nèi)的分布及免疫反應(yīng)動力學(xué)研究。

5. 熒光示蹤與動力學(xué)研究

可用于分析蛋白質(zhì)在體外體系中的運(yùn)輸、內(nèi)吞及代謝過程。

七、實驗使用建議

避光操作：FITC 對光敏感，實驗操作和儲存需避光。

緩沖液選擇：推薦 PBS 或 Tris，避免強(qiáng)還原劑或高濃度游離氨基。

溫度控制：低溫（4℃）操作可保持蛋白結(jié)構(gòu)及熒光性能。

濃度優(yōu)化：根據(jù)實驗需求調(diào)整工作濃度，保證信號清晰且蛋白功能完整。

分裝儲存：凍干分裝可延長使用壽命，避免反復(fù)凍融。

八、總結(jié)

FITC-OVA（異硫氰酸熒光素標(biāo)記卵清蛋白） 是結(jié)合 OVA 天然免疫原性與 FITC 明亮綠色熒光特性 的高性能標(biāo)記蛋白。通過綠色熒光信號，可在體外研究*原攝取、細(xì)胞內(nèi)分布及免疫反應(yīng)動力學(xué)，同時保持蛋白的天然功能。

憑借 明亮綠色熒光、免疫原性完整、光穩(wěn)定性好及多用途應(yīng)用，F(xiàn)ITC-OVA 廣泛應(yīng)用于 細(xì)胞成像、流式細(xì)胞術(shù)、*原示蹤、免疫動力學(xué)及疫苗模型研究，為生命科學(xué)和免疫學(xué)實驗提供可靠、可視化的科研工具。

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