產(chǎn)品名稱：CY5.5-OVA Cyanine5.5-Ovalbumin 花菁染料 CY5.5 標記卵清蛋白

產(chǎn)品描述：

CY5.5-OVA Cyanine5.5-Ovalbumin 花菁染料 CY5.5 標記卵清蛋白

一、產(chǎn)品概述

CY5.5-OVA 是將 近紅外熒光染料 Cyanine5.5（CY5.5） 與 卵清蛋白（Ovalbumin, OVA） 共價偶聯(lián)制備的高性能熒光標記蛋白。OVA 是來源于雞蛋清的主要蛋白質(zhì)，分子量約 45 kDa，具有 良好的水溶性、熱穩(wěn)定性以及免疫原性，廣泛應(yīng)用于 免疫學(xué)研究、*原示蹤及疫苗模型實驗。

通過 CY5.5 標記，OVA 獲得 明亮的紅外熒光信號（激發(fā)波長約 675 nm，發(fā)射波長約 694 nm），可用于 流式細胞術(shù)、共聚焦顯微鏡、多通道成像及*原內(nèi)吞動力學(xué)研究。CY5.5-OVA 將 OVA 的天然免疫原性與 CY5.5 的高靈敏度紅外熒光特性結(jié)合，為生命科學(xué)研究提供高靈敏、可視化的實驗工具。

二、分子結(jié)構(gòu)與標記原理

CY5.5-OVA 分子結(jié)構(gòu)主要由三個部分組成：

熒光模塊（CY5.5）

CY5.5 是近紅外熒光染料，激發(fā)波長約 675 nm，發(fā)射波長約 694 nm。

光穩(wěn)定性高、量子產(chǎn)率大，可進行長時間成像及體外/體內(nèi)實驗。

蛋白模塊（OVA）

Ovalbumin 分子穩(wěn)定、溶解性好，并保持完整免疫原性。

可被*原遞呈細胞識別，用于*原攝取及免疫反應(yīng)分析。

化學(xué)連接模塊

CY5.5 通常通過 NHS ester 或 Sulfo-NHS ester 與 OVA 的賴氨酸氨基共價結(jié)合，形成穩(wěn)定酰胺鍵。

可根據(jù)實驗需求調(diào)節(jié)染料與蛋白摩爾比，保證熒光強度與蛋白功能兼顧。

這種設(shè)計確保 CY5.5-OVA 熒光明亮、蛋白功能保留、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，適合多種體外及體內(nèi)研究體系。

三、制備方法

CY5.5-OVA 的制備一般包括以下步驟：

1. 熒光染料活化

使用 CY5.5 的 NHS ester 或 Sulfo-NHS ester 形式，使其能夠與 OVA 的賴氨酸氨基共價結(jié)合。

2. 偶聯(lián)反應(yīng)

在 PBS 或碳酸鹽緩沖液（pH 7.4–8.5）中，將活化的 CY5.5 與 OVA 混合。

NHS 酯與 OVA 氨基反應(yīng)生成穩(wěn)定的酰胺鍵。

反應(yīng)在低溫（4℃）及避光條件下進行，以保持蛋白結(jié)構(gòu)和熒光性能。

3. 純化

采用透析、凝膠過濾或超濾去除未結(jié)合的 CY5.5。

得到高純度 CY5.5-OVA，保持蛋白完整性和熒光特性。

4. 表征

紫外-可見光譜：CY5.5 特征吸收峰約 675 nm

熒光光譜：發(fā)射峰約 694 nm

SDS-PAGE：檢測蛋白完整性

標記度測定（DOL）：確定每個 OVA 分子平均偶聯(lián)的 CY5.5 數(shù)量

通過表征方法，可確保 CY5.5-OVA 的熒光性能和蛋白活性滿足科研標準。

四、理化性質(zhì)

激發(fā)波長（Ex）：約 675 nm

發(fā)射波長（Em）：約 694 nm

外觀：深紅色凍干粉末或溶液

溶解性：可溶于 PBS、Tris 緩沖液及水性溶液

儲存條件：?20℃ 避光

穩(wěn)定性：低溫避光條件下熒光和蛋白活性穩(wěn)定

CY5.5-OVA 在水溶液和生物體系中均具有穩(wěn)定性，適用于體外和體內(nèi)多種實驗條件。

五、產(chǎn)品特點

明亮紅外熒光：便于多通道成像及體外/體內(nèi)觀察，適合與綠色或黃色熒光染料組合。

保留*原特性：OVA 的天然免疫原性完整，可被*原遞呈細胞識別。

多用途應(yīng)用：適用于流式細胞術(shù)、共聚焦顯微鏡、多通道成像及*原動力學(xué)研究。

光穩(wěn)定性強：*光漂白，可進行長時間成像實驗。

高純度低非特異性吸附：實驗信號可靠、特異性高。

六、主要應(yīng)用領(lǐng)域

1. *原遞呈與免疫學(xué)研究

CY5.5-OVA 可用于監(jiān)測*原在細胞內(nèi)攝取、加工和遞呈過程。

用于分析*原遞呈細胞（APC）的吞噬、內(nèi)體運輸及溶酶體處理機制。

2. 細胞成像與共聚焦顯微鏡

可觀察 OVA 在細胞膜、內(nèi)體及溶酶體中的分布。

紅外熒光可與綠色、黃色染料聯(lián)合進行多通道成像分析。

3. 流式細胞術(shù)

可用于定量分析*原攝取效率、內(nèi)吞動力學(xué)及細胞免疫狀態(tài)。

4. 疫苗模型與免疫反應(yīng)研究

用于模擬*原在體內(nèi)分布及免疫反應(yīng)動力學(xué)。

5. 熒光示蹤與蛋白動力學(xué)研究

可用于分析 OVA 在體外或體內(nèi)體系中的運輸、內(nèi)吞及代謝過程。

七、實驗使用建議

避光操作：CY5.5 對光敏感，實驗操作及儲存需避光。

緩沖液選擇：推薦 PBS 或 Tris，避免強還原劑或高濃度游離氨基。

溫度控制：低溫（4℃）操作可保持蛋白結(jié)構(gòu)及熒光性能。

濃度優(yōu)化：根據(jù)實驗需求調(diào)整工作濃度，保證信號清晰且蛋白功能完整。

分裝儲存：凍干分裝可延長使用壽命，避免反復(fù)凍融。

八、總結(jié)

CY5.5-OVA（花菁染料 CY5.5 標記卵清蛋白） 是結(jié)合 OVA 天然免疫原性與 CY5.5 高靈敏度紅外熒光特性 的高性能標記蛋白。通過紅外熒光信號，可在體外研究*原攝取、內(nèi)吞及免疫反應(yīng)動力學(xué)，同時保持蛋白天然功能。

憑借 明亮紅外熒光、免疫原性完整、光穩(wěn)定性好及多用途應(yīng)用，CY5.5-OVA 廣泛應(yīng)用于 流式細胞術(shù)、共聚焦顯微鏡、多通道成像、*原示蹤及疫苗免疫研究，為生命科學(xué)和免疫學(xué)實驗提供可靠、可視化的科研工具。

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