產(chǎn)品名稱：RB-BSA Rhodamine B-BSA 羅丹明 B 標記牛血清白蛋白

產(chǎn)品描述：

RB-BSA Rhodamine B-BSA 羅丹明 B 標記牛血清白蛋白

一、產(chǎn)品概述

RB-BSA 是將 羅丹明 B（Rhodamine B, RB） 熒光染料與 牛血清白蛋白（Bovine Serum Albumin, BSA） 共價偶聯(lián)形成的高性能熒光蛋白。BSA 是分子量約 66 kDa 的血漿蛋白，具有 優(yōu)良的水溶性、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性和生物相容性，廣泛應用于 蛋白示蹤、免疫檢測、流式細胞術(shù)、共聚焦顯微鏡及生物材料研究。

RB 屬于橙紅色熒光染料，激發(fā)波長約 540–550 nm，發(fā)射波長約 570–580 nm，熒光亮度高、光穩(wěn)定性好、量子產(chǎn)率高。通過與 BSA 偶聯(lián)形成的 RB-BSA，兼具 蛋白的生物功能和 RB 的強熒光信號，可在多種科研實驗中實現(xiàn) 蛋白示蹤、內(nèi)吞分析、免疫標記及熒光成像。

二、分子結(jié)構(gòu)與標記原理

RB-BSA 分子主要由三個模塊組成：

熒光模塊（RB）

羅丹明 B 是橙紅色熒光染料，激發(fā)波長約 540–550 nm，發(fā)射波長約 570–580 nm。

熒光亮度高、光穩(wěn)定性好，適合多通道熒光成像和顯微分析。

蛋白模塊（BSA）

BSA 分子穩(wěn)定、可溶于水，并具有多個賴氨酸氨基和疏水結(jié)合位點，可作為蛋白示蹤和載體模型。

可用于免疫檢測、蛋白內(nèi)吞實驗及納米材料研究。

化學連接模塊

RB 通常以 NHS ester 或類似活化形式與 BSA 的氨基共價偶聯(lián)，形成穩(wěn)定酰胺鍵。

偶聯(lián)過程中可調(diào)節(jié)染料與蛋白摩爾比，以兼顧熒光強度和蛋白功能完整性。

這種共價偶聯(lián)方式確保 RB-BSA 結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、熒光亮度高、蛋白功能保留，適合多種體外和體內(nèi)實驗體系。

三、制備方法

RB-BSA 的制備步驟如下：

1. 熒光染料活化

將 Rhodamine B NHS ester 溶解于 PBS 或少量 DMSO 中，充分活化。

在避光條件下操作，保證染料反應活性。

2. 偶聯(lián)反應

將 BSA 溶于 PBS 或碳酸鹽緩沖液（pH 7.4–8.5），緩慢加入活化的 RB。

NHS ester 與 BSA 氨基形成穩(wěn)定的酰胺鍵。

反應在低溫（4℃）避光條件下進行，以保護蛋白結(jié)構(gòu)和熒光性能。

3. 純化

通過透析、凝膠過濾或超濾去除未結(jié)合的游離 RB。

獲得高純度、穩(wěn)定的 RB-BSA 復合物。

4. 表征

紫外-可見光譜：RB 特征吸收峰約 550 nm

熒光光譜：發(fā)射峰約 570–580 nm

SDS-PAGE：檢測蛋白完整性

標記度測定（DOL）：計算每個 BSA 分子平均偶聯(lián)的 RB 數(shù)量

表征確保 RB-BSA 的熒光性能和蛋白活性符合科研實驗需求。

四、理化性質(zhì)

激發(fā)波長（Ex）：約 540–550 nm

發(fā)射波長（Em）：約 570–580 nm

外觀：橙紅色凍干粉末或水溶液

溶解性：水溶性良好，可溶于 PBS、Tris 緩沖液及其他水性體系

儲存條件：?20℃ 避光保存

穩(wěn)定性：低溫避光條件下熒光信號及蛋白活性穩(wěn)定

RB-BSA 在體外實驗中顯示出高熒光亮度和的光穩(wěn)定性，可用于高靈敏度檢測和示蹤實驗。

五、產(chǎn)品特點

明亮橙紅熒光：便于共聚焦顯微鏡、多通道成像及流式細胞分析。

蛋白功能完整：BSA 的天然結(jié)構(gòu)保留完整，可作為示蹤蛋白或載體使用。

多用途應用：蛋白示蹤、免疫檢測、流式分析、共聚焦成像及生物材料研究。

光穩(wěn)定性好：*光漂白，適合長時間熒光實驗。

水溶性優(yōu)良：實驗操作簡便，無需有機溶劑即可溶解。

六、主要應用領域

1. 蛋白示蹤與細胞攝取研究

RB-BSA 可用于觀察細胞內(nèi)蛋白攝取及運輸路徑，包括內(nèi)體、溶酶體及細胞膜蛋白分布。

2. 共聚焦顯微鏡與熒光成像

橙紅色熒光信號可與其他綠色或近紅外染料聯(lián)合，實現(xiàn)多通道成像。

3. 流式細胞術(shù)

可用于定量分析蛋白攝取效率、細胞內(nèi)分布及動態(tài)變化。

4. 藥物載體與納米醫(yī)學研究

BSA 作為藥物載體模型，RB-BSA 可用于藥物分布及內(nèi)吞示蹤。

5. 體外免疫分析與生物標記

可用于蛋白相互作用分析、免疫檢測及熒光標記實驗。

七、實驗使用建議

避光操作：RB 對光敏感，操作和儲存需避光。

緩沖液選擇：推薦 PBS 或 Tris，避免強還原劑。

溫度控制：低溫操作（4℃）可保持蛋白結(jié)構(gòu)和熒光性能。

濃度優(yōu)化：根據(jù)實驗需求調(diào)整工作濃度，確保熒光信號清晰。

分裝儲存：凍干或低溫分裝，避免反復凍融。

八、總結(jié)

RB-BSA（Rhodamine B 標記牛血清白蛋白） 將 BSA 的穩(wěn)定性與羅丹明 B 的橙紅熒光結(jié)合，形成水溶性、光穩(wěn)定的熒光復合蛋白。通過熒光信號，可實現(xiàn)蛋白示蹤、細胞內(nèi)分布分析、免疫檢測及藥物載體示蹤等科研應用。

憑借 熒光亮度高、蛋白功能完整、光穩(wěn)定性強及多用途應用，RB-BSA 已成為 蛋白示蹤、流式細胞術(shù)、共聚焦成像及生物材料研究中可靠、高靈敏的科研工具。

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