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FITC-BSA Fluorescein Isothiocyanate-BSA 異硫氰酸熒光素標(biāo)記牛血清白蛋白
文章來源 : 齊岳生物
作者:小編zyl
發(fā)布時(shí)間 : 2026-03-16 15:35:14
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產(chǎn)品名稱:FITC-BSA Fluorescein Isothiocyanate-BSA 異硫氰酸熒光素標(biāo)記牛血清白蛋白
產(chǎn)品描述:
FITC-BSA Fluorescein Isothiocyanate-BSA 異硫氰酸熒光素標(biāo)記牛血清白蛋白
一、產(chǎn)品概述
FITC-BSA 是將 異硫氰酸熒光素(Fluorescein Isothiocyanate, FITC) 與 牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin, BSA) 共價(jià)偶聯(lián)形成的高性能熒光標(biāo)記蛋白。BSA 是分子量約 66 kDa 的血漿蛋白,具有 良好的水溶性、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性及生物相容性,在生物科研中廣泛用于 蛋白示蹤、免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞術(shù)、共聚焦顯微鏡及藥物載體研究。
FITC 屬于綠色熒光染料,激發(fā)波長約 495 nm,發(fā)射波長約 519 nm,熒光亮度高、光穩(wěn)定性好、量子產(chǎn)率高。通過與 BSA 偶聯(lián)形成的 FITC-BSA,兼具 蛋白的生物功能性與 FITC 的熒光特性,可在體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中實(shí)現(xiàn) 蛋白示蹤、細(xì)胞內(nèi)攝取分析、免疫標(biāo)記及熒光成像。
二、分子結(jié)構(gòu)與標(biāo)記原理
FITC-BSA 分子主要由三個(gè)模塊組成:
熒光模塊(FITC)
FITC 為綠色熒光染料,激發(fā)波長約 495 nm,發(fā)射波長約 519 nm。
熒光亮度高、光穩(wěn)定性好,可進(jìn)行顯微成像、流式細(xì)胞分析及多通道實(shí)驗(yàn)。
蛋白模塊(BSA)
BSA 分子穩(wěn)定、可溶于水,并具有多種氨基結(jié)合位點(diǎn),可作為示蹤蛋白或載體。
可用于蛋白示蹤、免疫檢測及納米材料研究。
化學(xué)連接模塊
FITC 通過異硫氰酸基(–N=C=S)與 BSA 的賴氨酸氨基共價(jià)結(jié)合,形成穩(wěn)定的硫脲鍵。
偶聯(lián)過程中可調(diào)節(jié)染料與蛋白摩爾比,以兼顧熒光強(qiáng)度和蛋白功能完整性。
這種共價(jià)偶聯(lián)方式保證 FITC-BSA 結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、熒光亮度高、蛋白功能保留,適用于多種科研實(shí)驗(yàn)。
三、制備方法
FITC-BSA 的制備通常包括以下步驟:
1. 熒光染料活化
將 FITC 溶解于緩沖液(如碳酸鹽緩沖液,pH 9.0–9.5)或少量 DMSO。
在避光條件下操作,保證 FITC 活性和熒光性能。
2. 偶聯(lián)反應(yīng)
將 BSA 溶于 PBS 或碳酸鹽緩沖液中,緩慢加入 FITC 溶液。
異硫氰酸基與 BSA 氨基形成穩(wěn)定硫脲鍵,反應(yīng)在低溫(4℃)及避光條件下進(jìn)行。
3. 純化
通過透析、凝膠過濾或超濾去除未結(jié)合的游離 FITC。
獲得高純度、穩(wěn)定的 FITC-BSA 蛋白復(fù)合物。
4. 表征
紫外-可見光譜:FITC 特征吸收峰約 495 nm
熒光光譜:發(fā)射峰約 519 nm
SDS-PAGE:檢測蛋白完整性
標(biāo)記度測定(DOL):計(jì)算每個(gè) BSA 分子平均偶聯(lián)的 FITC 數(shù)量
表征確保 FITC-BSA 的熒光性能和蛋白活性滿足科研實(shí)驗(yàn)要求。
四、理化性質(zhì)
激發(fā)波長(Ex):約 495 nm
發(fā)射波長(Em):約 519 nm
外觀:淺綠色凍干粉末或水溶液
溶解性:水溶性良好,可溶于 PBS、Tris 緩沖液及其他水性體系
儲(chǔ)存條件:?20℃ 避光保存
穩(wěn)定性:低溫避光條件下熒光信號及蛋白活性穩(wěn)定
FITC-BSA 在體外實(shí)驗(yàn)體系中表現(xiàn)出高熒光亮度和的光穩(wěn)定性,適合長時(shí)間觀察和定量分析。
五、產(chǎn)品特點(diǎn)
明亮綠色熒光:適合共聚焦顯微鏡、多通道成像及流式細(xì)胞分析。
蛋白功能完整:BSA 的天然結(jié)構(gòu)和功能保留,可作為示蹤蛋白或載體使用。
多用途應(yīng)用:蛋白示蹤、免疫檢測、流式分析、共聚焦成像及藥物載體示蹤。
光穩(wěn)定性好:*光漂白,適合長時(shí)間熒光實(shí)驗(yàn)。
水溶性優(yōu)良:實(shí)驗(yàn)操作簡便,無需有機(jī)溶劑即可溶解。
六、主要應(yīng)用領(lǐng)域
1. 蛋白示蹤與細(xì)胞攝取研究
FITC-BSA 可用于觀察細(xì)胞內(nèi)蛋白攝取及運(yùn)輸路徑,包括內(nèi)體、溶酶體及細(xì)胞膜蛋白分布。
2. 共聚焦顯微鏡與熒光成像
綠色熒光信號可與其他紅色或近紅外染料聯(lián)合使用,實(shí)現(xiàn)多通道成像。
3. 流式細(xì)胞術(shù)
可用于定量分析蛋白攝取效率、細(xì)胞內(nèi)分布及動(dòng)態(tài)變化。
4. 藥物載體與納米醫(yī)學(xué)研究
BSA 作為蛋白載體模型,F(xiàn)ITC-BSA 可用于藥物分布及內(nèi)吞示蹤。
5. 體外免疫分析與生物標(biāo)記
可用于蛋白相互作用分析、免疫檢測及熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)。
七、實(shí)驗(yàn)使用建議
避光操作:FITC 對光敏感,操作和儲(chǔ)存需避光。
緩沖液選擇:推薦 PBS 或 Tris,避免強(qiáng)還原劑。
溫度控制:低溫(4℃)操作可保持蛋白結(jié)構(gòu)和熒光性能。
濃度優(yōu)化:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整工作濃度,確保熒光信號清晰。
分裝儲(chǔ)存:凍干或低溫分裝,避免反復(fù)凍融。
八、總結(jié)
FITC-BSA(異硫氰酸熒光素標(biāo)記牛血清白蛋白) 將 BSA 的生物相容性與穩(wěn)定性與 FITC 的綠色熒光特性完美結(jié)合,形成水溶性、光穩(wěn)定的熒光復(fù)合蛋白。通過熒光信號,可實(shí)現(xiàn)蛋白示蹤、細(xì)胞內(nèi)分布分析、免疫檢測及藥物載體示蹤等科研應(yīng)用。
憑借 熒光亮度高、蛋白功能完整、光穩(wěn)定性強(qiáng)及多用途應(yīng)用,F(xiàn)ITC-BSA 已成為 蛋白示蹤、流式細(xì)胞術(shù)、共聚焦成像及生物材料研究中可靠、高靈敏的科研工具。
西安齊岳生物科技有限公司提供專業(yè)的熒光標(biāo)記服務(wù)與定制解決方案,致力于滿足科研與應(yīng)用領(lǐng)域?qū)Ω咝阅軣晒鈽?biāo)記產(chǎn)品的需求。公司可針對蛋白質(zhì)、肽、多糖、小分子化合物以及納米材料進(jìn)行高效、穩(wěn)定的熒光修飾,涵蓋從可見光到近紅外 NIR)范圍的多種熒光染料,如FITC、Cy3、Cy5、Cy5.5及Cy7等。
齊岳生物在標(biāo)記過程中充分考慮分子特性與功能活性,通過共價(jià)偶聯(lián)或特定位點(diǎn)修飾實(shí)現(xiàn)高標(biāo)記率與信號穩(wěn)定性。針對客戶的個(gè)性化需求,公司可提供從分子設(shè)計(jì)、標(biāo)記反應(yīng)、產(chǎn)物純化到質(zhì)量檢測的全流程定制服務(wù),并通過嚴(yán)格的質(zhì)量控制確保每批產(chǎn)品的純度、標(biāo)記效率及生物活性均符合科研標(biāo)準(zhǔn)。
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